內(nèi)源性n-3多不飽和脂肪酸對faT-1轉(zhuǎn)基因小鼠糖脂代謝和機體抗氧化能力的影響.pdf

1、心腦血管疾病是目前嚴重危害人類健康的主要殺手，而高血脂癥、高血糖、動脈粥樣硬化是其病理與生理基礎(chǔ)。根據(jù)2001年世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球因心腦血管疾病導致的死亡人數(shù)占全部死亡人數(shù)的30％，且有逐年遞增的趨勢，而日常膳食結(jié)構(gòu)的不合理是誘發(fā)血脂異常的重要原因。
　　n-3多不飽和脂肪酸(n-3 PUFAs)是魚油的主要成分，研究表明提高食物中n-3PUFAs的比例對人類的健康有重要意義，動物實驗以及體外的實驗研究發(fā)現(xiàn)，n-3 PUFAs

2、在預防和治療心腦血管疾病、糖尿病和癌癥等方面起非常重要的作用。同時還影響人的生長發(fā)育，改善大腦機能，提高學習能力和記憶能力。但是，在人類的食物中，n-3 PUFAs的含量比較低，n-6 PUFAs含量較高，造成了n-6/n-3PUFAs的比例嚴重失調(diào)，研究發(fā)現(xiàn)n-6/n-3 PUFAs比例失調(diào)是心血管疾病的主要誘因。因此迫切需要建立一個n-6/n-3 PUFAs比例平衡的一個動物模型用來研究n-3 PUFAs的生理功能。1997年，Sp

3、ychalla等在模式生物擬南芥上驗證了來源于C.elegans的fat-1基因的功能，發(fā)現(xiàn)fat-1基因能夠?qū)-6 PUFAs轉(zhuǎn)化為n-3PUFAs。2004年，哈佛大學的康景軒博士將fat-1基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，建立的fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠可以將體內(nèi)的n-6 PUFAs轉(zhuǎn)化為n-3 PUFAs，為我們研究內(nèi)源性n-3PUFAs在調(diào)節(jié)血糖、血脂方面提供了好的動物模型。本實驗我們利用fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠模型，探討內(nèi)源性n-3 PUFAs對

4、小鼠糖脂代謝與抗氧化能力的影響，為進一步研究n-3 PUFAs在預防糖脂代謝紊亂與心血管疾病的作用機制提供實驗室基礎(chǔ)與臨床應用前期依據(jù)。
　　方法:以fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠為模型組，以C57BL/6野生型為對照組，每組各5只小鼠。實驗開始前空腹12小時，測體重與血糖值，然后給予含高n-6 PUFAs、低n-3 PUFAs的標準配方飼料，喂食4周，每周測體重。第4周末小鼠空腹12小時后做葡萄糖耐量試驗，然后對兩組同時給予高糖飲液自由飲

5、用，每周連續(xù)飲用5天，另2天自由飲水，分別測每組飲用高糖飲液后第7天、第14天、第21天、第28天的體重與血糖值，比較血糖變化。第八周末剪尾測脂肪酸的含量，摘眼球取血0.5-2.0 ml，離心取血清，測定血糖、胰島素、甘油三脂(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C)的水平。動物處死后，取肝臟和腦，分別測定肝臟、腦與血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)

6、和過氧化氫酶(CAT)的水平，整個實驗周期為8周。
　　結(jié)果顯示:從第二周末開始到第八周末的體重，fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠每周的體重增加幅度顯著低于野生型組小鼠(P＜0.05)。在第八周末，與野生型小鼠相比，fat-1小鼠的空腹血糖值和血清胰島素水平均明顯低于野生型小鼠(P＜0.05)，兩組小鼠胰島素抵抗指數(shù)存在顯著差異(P＜0.01); fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平均顯著低于野生型小鼠(P＜0.05

7、)。fat-1轉(zhuǎn)基因組小鼠的血清、肝臟、腦的SOD、GSH-Px和CAT的水平均高于野生型組小鼠(P＜0.05)，野生型小鼠MDA水平高于fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠(P＜0.05)。
　　以上結(jié)果表明，n-3 PUFAs能夠抑制小鼠體重的增長，降低其血糖與血脂水平，并可降低胰島素抵抗，提高小鼠的抗氧化能力。研究結(jié)果證實了n-3 PUFAs對小鼠糖脂代謝與抗氧化能力的作用，為進一步研究n-3PUFAs降血脂與抗氧化的機制機理，提供了前期的