應(yīng)用巴斯德畢赤酵母表達(dá)重組人TFPI.pdf_第1頁(yè)
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1、在多種疾病，例如，動(dòng)脈粥樣化損傷，癌癥，敗血癥等中，組織因子(TF)扮演了很重要的角色，其介導(dǎo)的凝血及血栓形成導(dǎo)致疾病的發(fā)展及患者的死亡。而組織因子途徑抑制因子(TFPI)作為組織因子的主要抑制因子，對(duì)血栓形成、感染性休克、血管再狹窄、內(nèi)毒素血癥和DIC等具有明顯防治作用。因此，重組TFPI的研制具有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值。目前的表達(dá)系統(tǒng)，例如，哺乳動(dòng)物細(xì)胞、釀酒酵母及大腸桿菌由于成本，表達(dá)量等原因，在TFPI重組蛋白表達(dá)方面還存在一定欠缺

2、。本論文應(yīng)用巴斯德畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)TFPI，以期獲得表達(dá)量更高的TFPI重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)。 本研究應(yīng)用G418篩選出含有高拷貝TFPI cDNA的巴斯德畢赤酵母菌株GS115—rhTFPI-PPIC9K anti—G4184.0mg/ml，使重組TFPI表達(dá)量從0.211±0.023mg/L提高到了1.255±0.223mg/L。建立了采用發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)重組酵母菌的實(shí)驗(yàn)室方法，使重組TFPI表達(dá)量提高了約5.45倍，達(dá)到

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