2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:泛素蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasome system,UPS)是除自噬以外的另一種存在于真核生物的重要的蛋白降解方式,它可以通過降解泛素蛋白來維持細胞的穩(wěn)定。去泛素羧基末端水解酶(UCH,ubiquitin carboxyterminalhydrolases)是UPS家族中的一員,近些年來有研究證實,UCH與某些腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關系。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)UCH-L3在急性髓細胞白血病細胞HL-60自噬性死亡中

2、表達上調,并且在急性髓細胞白血病患者外周血中表達明顯下調,為了更全面的探討UCH與AML的關系,我們進一步研究了UCH-L1與UCH-L5與白血病細胞自噬性死亡之間的關系,以及UCH-L1與UCH-L5在白血病發(fā)生發(fā)展及治療中的作用,從而深入探討泛素蛋白酶體系統(tǒng)與自噬在白血病的發(fā)生發(fā)展中的作用,為白血病的治療監(jiān)測指明一個新方向。
  方法:1.自噬誘導劑雷帕霉素和自噬抑制劑3-MA分別處理HL-60細胞后,RT-PCR檢測UCH-

3、L1、UCH-L5、LC3Ⅱ三者mRNA的表達變化。2.Western-blot檢測雷帕霉素和3-MA處理后UCH-L1、UCH-L5、LC3Ⅱ蛋白的表達水平。3.急性白血病化療藥物阿糖胞苷處理HL-60細胞后,RT-PCR檢測UCH-L1、UCH-L5、LC3Ⅱ三者mRNA的表達變化。4.提取急性髓白血病患者外周血單個核細胞,RT-PCR檢測初發(fā)組和緩解組UCH-L1、UCH-L5 mRNA的表達變化。
  結果:1.雷帕霉素處

4、理HL-60細胞后,RT-PCR檢測LC3Ⅱ在基因水平表達上調,UCH-L1和UCH-L5表達下調;3-MA處理HL-60細胞后,UCH-L1和UCH-L5表達上調,LC3Ⅱ下調。差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  2.雷帕霉素處理HL-60細胞后,LC3Ⅱ在蛋白水平表達上調,UCH-L1和UCH-L5蛋白表達下調,3-MA處理HL-60細胞后,UCH-L1和UCH-L5蛋白表達上調,LC3Ⅱ表達下調。差異有統(tǒng)計學意義(p<0

5、.05)。
  3.可糖胞苷處理HL-60細胞后UCH-L1和LC3Ⅱ表達上調,UCH-L5表達下調。差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  4.外周血基因水平檢測顯示,急性髓白血病初發(fā)組UCH-L1的表達和對照組相比下調,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),緩解組和對照組、緩解組和初發(fā)組相比UCH-L1的表達上調,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。初發(fā)組UCH-L5的表達和對照組相比表達下調,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)

6、;緩解組UCH-L5的表達和對照組相比表達下調,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);緩解組UCH-L5的表達和初發(fā)組相比表達上調,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  結論:1.誘導急性髓白血病細胞HL-60自噬后,UCH-L1和UCH-L5在基因與蛋白水平均發(fā)生表達變化,說明二者可能參與雷帕霉素誘導的急性髓白血病細胞的自噬發(fā)生過程。
  2.可糖胞苷處理HL-60細胞后LC3Ⅱ的表達上調,說明自噬參與了阿糖胞苷誘導急性髓細

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