小鼠標準化脊髓損傷模型的建立及miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓損傷機制研究.pdf

1、目的：
　　1.通過比較兩種構(gòu)建小鼠脊髓擊打損傷模型儀器各自的特點和優(yōu)勢，以期探索脊髓擊打損傷模型建立的標準化。
　　2.對脊髓損傷的miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠繼發(fā)性損傷的恢復(fù)狀況進行了解，進一步掌握miR-31調(diào)控或改善脊髓損傷微循環(huán)的機制。
　　方法：
　　第一部分：比較兩種構(gòu)建小鼠脊髓擊打損傷模型儀器
　　將40只小鼠隨機分為兩組，分別采用自制Allen脊髓打擊器（A組，n=20）和Impactor M-

2、Ⅲ脊髓撞擊器（B組，n=20）進行擊打，建立小鼠脊髓損傷模型。術(shù)后，于1d、3d、5d、7d、14d、21d六個時間節(jié)點，采用BBB運動功能評分對小鼠下肢恢復(fù)情況進行評估，記錄數(shù)據(jù)。并在3d、7d、14d、21d四個時間節(jié)點取實驗小鼠脊髓損傷處進行HE染色。
　　第二部分：miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓損傷機制研究
　　使用Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器分別對FVB小鼠（A組，n=30）和miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠（B組，n=3

3、0）進行擊打，成功建立小鼠脊髓損傷模型。術(shù)后，于3d、7d、14d、21d進行BBB評分、H E染色、免疫熒光檢測和熒光定量PCR檢測。
　　結(jié)果：
　　第一部分：兩組脊髓損傷模型在1d、3d、5d、21d四個時間節(jié)點恢復(fù)情況無明顯差異（P>0.05）。而在7d、14d，B組小鼠的脊髓損傷恢復(fù)狀況明顯優(yōu)于A組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在組織形態(tài)切片上差異不大。
　　第二部分：兩組不同小鼠在制作脊髓損傷模型后

4、，恢復(fù)趨勢雖大體相同，但仍有差異存在。BBB評分顯示在7d、14d，B組小鼠的脊髓損傷恢復(fù)狀況優(yōu)于A組。在組織形態(tài)上差異不大，只在14d、21d兩個時間點上存在少量差異。熒光和PCR結(jié)果顯示：Nestin的表達量趨勢兩組基本相同，只在14d、21d兩個時間點上B組優(yōu)于A組；NSE在表達上兩組存在差異，B組的表達量大于A組。
　　結(jié)論：
　　第一部分：兩種擊打脊髓的實驗儀器均可成功建立小鼠的脊髓損傷模型，采用Impactor