固本健腦法對老年健忘大鼠海馬組織中RAGE-NF-κB信號通路的影響.pdf

1、目的：
　　比較固本健腦法、補腎健腦法及補脾健腦法對老年健忘大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及海馬組織中RAGE/NF-κB信號通路的影響，綜合評價三者的療效差異，初步揭示固本健腦法改善老年健忘的部分分子機制。
　　方法：
　　SPF級健康雄性SD大鼠110只適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，用跳臺法篩選學(xué)習(xí)記憶能力相似者100只，隨機分為造模組85只、正常組15只，使用腹腔注射 NaNO2及 D-半乳糖（D-Gal）造模，1次/d，共40d。造模成

2、功大鼠共75只，將其隨機分成固本組、補腎組、補脾組、西藥組、模型組，每組15只，固本組、補腎組、補脾組、西藥組分別灌以固本健腦方、六味地黃丸、歸脾丸水煎液和石杉堿甲混懸液，正常組和模型組則灌以等體積的0.9％NaCl溶液，1次/d，共20d。給藥結(jié)束后，用跳臺法及水迷宮法測試其學(xué)習(xí)記憶能力。行為學(xué)測試完畢后，取大鼠海馬組織，檢測 AGEs的含量(免疫組化法)， RAGE、NF-κB p65的表達（Western Blot），Aβ1-42

3、、IL-1β、TNF-α的含量（ELISA）。
　　結(jié)果：
　　1、老年健忘動物模型的建立與空白組比較，造模組大鼠毛發(fā)枯黃，唇爪暗紅粗糙，活動遲緩，飲食精神差，呈明顯的衰老狀態(tài)；在跳臺法測試中，造模組動物潛伏期縮短（P<0.05）、5min出錯次數(shù)增多（P<0.05）；在水迷宮定位航行實驗中，模型組潛伏期延長（P<0.05）、游泳總路程增多(P<0.05)；在水迷宮空間探索實驗中，模型組經(jīng)過原平臺位置次數(shù)及在目標(biāo)象限停留時間

4、減少(P<0.05)、首次抵達目標(biāo)范圍的時間變長(P<0.05)。
　　2、固本健腦法對大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響與空白組比較，在跳臺法測試中，模型組大鼠潛伏期變縮短(P<0.05)，5 min出錯次數(shù)增多（P<0.05），在水迷宮定位航行實驗中，模型組潛伏期延長(P<0.05)，游泳總路程增多(P<0.05)，在水迷宮空間探索實驗中，模型組經(jīng)過原平臺位置的次數(shù)及在目標(biāo)象限停留時間減少(P<0.05)，首次抵達目標(biāo)范圍時間變長（P<0

5、.05）；各給藥組和空白組比較結(jié)果同上，與模型組比較則相反；補腎組、補脾組、西藥組與固本組比較，結(jié)果與模型組、空白組二者相比較一致；補腎組、補脾組、西藥組組間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　3、模型組、補腎組、補脾組、西藥組AGEs、Aβ1-42的表達上調(diào)（P<0.05），固本組 AGEs的表達上調(diào)，Aβ1-42則差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與模型組比較，各給藥組AGEs、Aβ1-42的表達均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比

6、較，其余給藥組AGEs、Aβ1-42的表達上調(diào)（P<0.05）；補腎組、補脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。固本健腦法對大鼠海馬組織中 AGEs、Aβ1-42的影響與空白組比較，模型組、補腎組、補脾組、西藥組AGEs、Aβ1-42的表達上調(diào)（P<0.05），固本組 AGEs的表達上調(diào)，Aβ1-42則差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與模型組比較，各給藥組AGEs、Aβ1-42的表達均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比較，其余給

7、藥組AGEs、Aβ1-42的表達上調(diào)（P<0.05）；補腎組、補脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　4、固本健腦法對大鼠海馬組織中RAGE、NF-κBp65的影響與空白組比較，模型組及各給藥組RAGE、NF-κBp65的表達上調(diào)（P<0.05）；與模型組比較，各給藥組RAGE、NF-κBp65的表達均下調(diào)（P<0.05）；與固本組比較，其余給藥組RAGE、NF-κBp65的表達上調(diào)（P<0.05）；

8、補腎組、補脾組、西藥組組間比較，差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　5、固本健腦法對大鼠海馬組織中IL-1β、TNF-α的影響與空白組比較，模型組及各給藥組IL-1β、TNF-α的相對含量增多（P<0.05）。與模型組比較，各給藥組IL-1β、TNF-α的相對含量減少（P<0.05），與固本組比較，其余給藥組IL-1β、TNF-α的相對含量增多（P<0.05），補腎組、補脾組、西藥組組間兩兩比較，差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.

9、05）。
　　結(jié)論：
　　1、造模結(jié)束后，造模組大鼠不僅處于明顯衰老的狀態(tài)，其學(xué)習(xí)記憶能力也大幅度下降，說明本實驗成功建立了老年健忘動物模型。
　　2、固本健腦法、補腎健腦法、補脾健腦法均能在一定程度上改善老年健忘動物的學(xué)習(xí)記憶功能，但固本健腦法的作用最佳。
　　3、老年健忘與AGEs、 Aβ1-42激活RAGE/ NF-κBp65信號通路，促使大量炎因子（IL-1β、TNF-α等）的表達和釋放，引起海馬腦區(qū)炎癥