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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察替米沙坦和胰島素對(duì)1型糖尿病大鼠睪丸組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-78(GRP-78)、半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-12(caspase-12)、沉默信息調(diào)節(jié)因子1(Sirt1)mRNA表達(dá)的影響,探討替米沙坦和胰島素對(duì)糖尿病大鼠的睪丸保護(hù)作用及機(jī)制。
方法:
雄性SD大鼠36只隨機(jī)分為正常對(duì)照組8只(A組)和糖尿病造模組28只。用鏈脲佐菌素(
2、STZ)誘導(dǎo)T1DM模型,24只成功。造模成功的大鼠被隨機(jī)分為糖尿病組(B組,n=8)、糖尿病胰島素治療組(C組,n=8)和替米沙坦治療組(D組, n=8)。給C、D組分別予以胰島素注射及替米沙坦灌胃,C組每日予以精蛋白鋅胰島素注射液3-5U/只皮下注射,血糖控制在約10mmol/l,D組給予替米沙坦10mg/kg/d灌胃。A組和B組等量生理鹽水。于實(shí)驗(yàn)第8周末留取血標(biāo)本,然后處死動(dòng)物,迅速取出雙側(cè)睪丸,稱重并計(jì)算睪丸指數(shù),剪下附睪制備
3、精子懸液,計(jì)數(shù)精子數(shù)量及活動(dòng)率。睪丸組織迅速投入液氮中,凍透后保存于-70℃冰箱待用。睪酮水平用放射免疫法測(cè)定。CHOP、GRP-78、Caspase-12、Sirt1 mRNA表達(dá)水平用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定。
結(jié)果:
1、與A組比較,B組糖尿病大鼠血糖[(5.11±0.23)比(27.38±0.82)mmol/l,P<0.05]明顯升高,睪酮[血清睪酮(1.60±0.38)比(3.75±1.01)ng/ml,睪丸
4、睪酮(0.45±0.12)比(3.31±0.26)pg/μg蛋白,均P<0.05]、睪丸重量[(1.79±1.10)比(3.23±0.49)g,P<0.05]、精子數(shù)量[(38.25±3.06)比(34.38±3.58)x106個(gè)/mL, P<0.05]及活動(dòng)率[83.13±3.68)比(74.38±7.01)%,P<0.05]水平明顯降低,睪丸CHOP、GRP-78、Caspase-12 mRNA[(1.33±0.04)比(1.00±
5、0.00)、(1.64±0.16)比(1.00±0.00)、(1.55±0.13)比(1.00±0.00),均P<0.05]表達(dá)水平明顯升高,Sirt1 mRNA[(0.52±0.04)比(1.00±0.00),P<0.05]表達(dá)水平明顯降低。
2、經(jīng)胰島素治療后,C組大鼠血糖[(9.71±0.23)比(27.38±0.82)mmol/l,P<0.05]較B組明顯降低,睪酮[血清睪酮(2.48±0.57)比(1.60±0.38
6、)ng/ml,睪丸睪酮(3.11±0.63)比(0.45±0.12)pg/μg蛋白,均P<0.05]、睪丸重量[(3.05±0.36)比(1.79±1.10)g,P<0.05]、精子數(shù)量[(34.38±3.58)比(7.75±1.67)x106個(gè)/mL, P<0.05]及活動(dòng)率[(74.38±7.01)比(19.25±2.38)%,P<0.05]較B組明顯升高,睪丸CHOP、GRP-78、Caspase-12 mRNA表達(dá)水平較B組明顯
7、降低[(0.98±0.06)比(1.33±0.04)、(1.21±0.08)比(1.64±0.16)、(1.24±0.10)比(1.55±0.13),均P<0.05],Sirt1 mRNA表達(dá)水平較B組明顯升高[(0.83±0.09)比(0.52±0.04),P<0.05]。
3、替米沙坦治療后,D組大鼠血糖[(21.28±0.54)比(27.38±0.82)mmol/l,P<0.05]較B組明顯降低,精子數(shù)量[(11.1±2
8、.03)比(7.75±1.67)x106個(gè)/mL,P<0.05]、精子活動(dòng)率[(30.13±3.83)比(19.25±2.38)%,P<0.05]明顯升高,睪酮[血清睪酮(1.71±0.32)比(1.60±0.38)ng/ml,睪丸睪酮(0.58±0.10)比(0.45±0.12)pg/μg蛋白,P>0.05]、睪丸重量[(2.16±0.99)比(1.79±1.10)g,P>0.05]無(wú)明顯變化,睪丸CHOP、GRP-78、Caspas
9、e-12 mRNA表達(dá)水平均較B組明顯降低[(1.29±0.04)比(1.33±0.04)、(1.36±0.12)比(1.64±0.16)、(1.33±0.09)比(1.55±0.13),均P<0.05],Sirt1 mRNA表達(dá)水平較B組明顯升高[(0.69±0.07)比(0.52±0.04),均P<0.05]。
4、四組大鼠睪丸指數(shù)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(0.94±0.20)比(1.07±0.52)、(0.73±0.08
10、)比(0.94±0.201)、(0.73±0.08)比(1.07±0.52)、(1.03±0.39)比(0.94±0.201)、(1.03±0.39)比(1.07±0.52)(P均>0.05)]。
結(jié)論:
1、糖尿病大鼠睪丸CHOP、GRP-78和Caspase-12表達(dá)水平升高,Sirt1表達(dá)水平降低,導(dǎo)致睪丸內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平升高,沉默信息調(diào)節(jié)因子1保護(hù)作用減低,最終可致糖尿病大鼠睪丸病變的發(fā)生。
2、替米
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