2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:Brahma相關(guān)基因1(Brahma-related gene1,Brg1)是染色質(zhì)重塑復(fù)合物SWI/SNF的ATP酶亞基之一,廣泛存在于真核細(xì)胞中。以往的研究表明,Brg1結(jié)合復(fù)合物參與不同類型細(xì)胞的細(xì)胞周期控制、凋亡和細(xì)胞分化。到目前為止,沒有關(guān)于眼表上皮細(xì)胞Brg1表達(dá)以及功能的報(bào)道。
  方法:對(duì)小鼠、兔以及人眼表組織的Brg1表達(dá)和定位進(jìn)行免疫熒光染色和蛋白質(zhì)印跡檢測。人角膜上皮細(xì)胞株(HCE),小鼠角膜上皮細(xì)胞系

2、(TKE2),小鼠原代培養(yǎng)的角膜上皮細(xì)胞(mCEC)分別在DMEM/F12+10%FBS,KSFM,和CNT-20培養(yǎng)基中培養(yǎng)。兔角膜緣上皮細(xì)胞進(jìn)行克隆培養(yǎng)。采用0.9mM Ca2+,10%FBS或Brg1 siRNA處理TKE2,探討B(tài)rg1在角膜上皮細(xì)胞分化中的作用。另外,對(duì)翼狀胬肉組織的Brg1表達(dá)進(jìn)行免疫熒光染色及PCR檢測。
  結(jié)果:在小鼠出生后第0-7天,角膜上皮未見Brg1表達(dá),第2周開始在角膜上皮基底層有少量細(xì)胞

3、表達(dá),第3周見陽性細(xì)胞擴(kuò)展至基底上層,至第4周中央角膜上皮呈全層表達(dá)。角膜緣處均無表達(dá)。Brg1在人角膜緣上皮細(xì)胞基底層無表達(dá),而在角膜緣上層、外周和中央角膜上皮細(xì)胞全層表達(dá)。在兔角膜緣和角膜組織中,Brg1呈現(xiàn)類似的表達(dá)模式。免疫熒光染色顯示,TKE2細(xì)胞系、HCE細(xì)胞系和mCEC細(xì)胞核中均有Brg1表達(dá),但在核中的表達(dá)分布不同。兔角膜緣上皮細(xì)胞克隆未見Brg1表達(dá),而在原代培養(yǎng)的兔角膜緣上皮細(xì)胞和兔中央角膜上皮細(xì)胞中,Brg1均呈核

4、表達(dá)。TKE2在0.9mM Ca2+或10%FBS誘導(dǎo)分化后,細(xì)胞中Brg1表達(dá)水平?jīng)]有明顯改變,但在細(xì)胞核中的分布方式發(fā)生變化。TKE2細(xì)胞轉(zhuǎn)染Brg1 siRNA后,經(jīng)過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn),Brg1表達(dá)水平下降,而p63、K14等干細(xì)胞特異性蛋白表達(dá)水平增高,同時(shí)與上皮細(xì)胞分化相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子Klf4表達(dá)水平降低。人及兔正常結(jié)膜組織只在上皮表層有少量Brg1表達(dá),但翼狀胬肉上皮層全層細(xì)胞高表達(dá)Brg1。
  結(jié)論:Brg

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