骨軟骨組織體外培養(yǎng)保存方法的探索.pdf

1、泰山醫(yī)學院碩士學位論文骨軟骨組織體外培養(yǎng)保存方法的探索姓名：胡遵杰申請學位級別：碩士專業(yè)：運動醫(yī)學指導教師：亓建洪201205組為基礎培養(yǎng)液加100ng／m1的IGFI；III組為基礎培養(yǎng)液加001nun01／L的EGCG；Ⅳ組為基礎培養(yǎng)液同時加入100ng／ml的IGFI和001mmol／L的EGCG。將這四組培養(yǎng)瓶保存于第一步得出的最佳溫度與液體處理條件中。分別檢測新鮮、7天、21天、42天、56天之后組織細胞的存活率、HE、番紅O

2、染色及II型膠原SABCFITC免疫熒光染色。分析各組保存效果。結果第一部分，除保存7天時溫度因素，以及溫度與液體處理兩因素交互作用對細胞存活率沒有影響之外，其余各時間點的溫度因素、液體處理因素及溫度與液體處理兩因素交互作用都對細胞存活率的變化產生了影響，其中保存7天、21天、35天時細胞存活率最高值分別為9088士369％、8831士393％、7869士856％，均出現在4℃條件下換液保存組。對各組番紅O的分析除了保存7天時A組IOD

3、值明顯高于其他三組外，其他保存時間點IOD值組間比較無顯著差異。各組保存效果隨著時間的延長出現了明顯的下降趨勢，且下降速率從保存21天起迅速增加。因此，4℃條件下換液保存法保存骨軟骨組織效果比37℃j不換液效果好。第二部分，保存7天時，基礎培養(yǎng)液組(I)、基礎培養(yǎng)液IGFI組(II)、基礎培養(yǎng)液EGCG組(III)細胞存活率組間無明顯差別，均從新鮮的8745士359％降至81％左右，基礎培養(yǎng)液EGCGIGFI組(Ⅳ)為6372士1242

4、％，出現明顯下降；保存21天時，后二組細胞存活率下降明顯，分別低至7017士388％和6469士563％，明顯低于前兩組的7858士310％和8041士387％；保存42天和56天時，各組各檢測指標均出現大幅下降，降至20％左右，組間差別不大，已無分析意義。對番紅O染色和II型膠原染色也表現出了相同的差別與變化趨勢。各組保存效果隨著時間的延長出現了明顯的下降趨勢，且下降速率從保存21天起迅速增加。因此，培養(yǎng)液中加入100ng／ml的IG