根面處理牙周炎牙骨質后內毒素水平變化及對牙周膜成纖維細胞影響的研究.pdf

1、牙周炎是最常見的口腔疾病之一，是導致牙齒缺失的主要疾病，其病因及發(fā)病機制仍是牙周病學研究熱點。牙周炎患牙的部分牙根表面牙骨質暴露于牙周袋內，感染后會發(fā)生結構性和理化性變化，嚴重影響牙周功能性細胞在牙根表面的生長和附著，阻礙牙周組織再生修復。人牙周膜成纖維細胞（human periodontal ligamentfibroblasts，hPDLFs）是構成牙周韌帶的重要細胞，在牙周致病菌及其毒性產(chǎn)物作用下會發(fā)生直接損傷或引發(fā)免疫應答反應，

2、導致牙周組織破壞。本研究主要觀察內毒素對hPDLFs增殖及IL-8分泌的影響;不同方法處理牙周炎患牙根面牙骨質后內毒素水平變化及其根面處理后的牙周炎牙骨質片對牙周膜成纖維細胞分泌細胞因子水平變化，為選擇臨床牙周炎治療方法提供依據(jù)。
　　本研究主要分為三部分實驗其目的、方法和結果如下:
　　實驗一:內毒素對人牙周膜成纖維細胞增殖及IL-8分泌的影響
　　目的:觀察不同濃度的內毒素（Lipopolysaccharides,

3、LPS）對PDLFs的影響及IL-8的分泌情況。
　　方法:本實驗分為五組，PDLFs組（陰性對照組）、1μg/ml LPS組、10μg/ml LPS組、100μg/ml LPS組、200μg/ml LPS組。各組細胞進行培養(yǎng)，MTT法觀察細胞增殖變化。24h，96h ELISA法檢測IL-8分泌情況。
　　結果:與PDLFs組比較，10μg/ml LPS促進PDLFs增殖;200μg/ml LPS抑制PDLFs增殖;24h

4、:200μg/ml LPS組促進IL-8分泌，有顯著性統(tǒng)計學差異。96h:100μg/ml LPS、200μg/mlLPS組促進IL-8分泌，有顯著性統(tǒng)計學差異。
　　結論:不同濃度的內毒素對PDLFs增殖、IL-8分泌合成釋放有調節(jié)作用。
　　實驗二:根面處理牙周炎患牙根面牙骨質后內毒素水平變化研究
　　目的:觀察不同方法處置牙周炎患牙根面牙骨質后內毒素水平變化。
　　方法:選擇臨床上正畸拔除的健康的前磨牙6例

5、，重度牙周炎拔除的后牙36例。每顆牙進行編號，依分組根面處理后于釉牙骨質界下2mm制成2片4mm×4 mm×1 mm的牙骨質片。健康牙為陰性對照組，36顆牙周炎患牙每顆牙中1個牙片不進行根面處理，為牙周炎組。其余36片牙周炎牙片隨機平均分成6組:齦下刮治及根面平整（scaling and rootplanning，SRP）組、SRP+抗菌肽A組、SRP+抗菌肽B組、SRP+EDTA組、SRP+ Nd∶YAG激光組和SRP+Er∶ YAG

6、激光組。顯色基質鱟試劑檢測每個牙片內毒素濃度。按照編號記錄每顆牙齒內毒素濃度，計算每組每個牙周炎患牙處理前后內毒素濃度變化。采用SPSS17.0軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　結果:與牙周炎組相比，各處理組內毒素濃度有不同程度降低，均有顯著性差異(P＜0.01)。與SRP組相比，SRP+抗菌肽A組、SRP+抗菌肽B組、SRP+Er∶ YAG激光組，內毒素濃度顯著下降(P＜0.01);SRP+EDTA組、SRP+ Nd∶ YAG激

7、光組均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結論:不同方法處理牙周炎患牙根面均可降低內毒素含量，抗菌肽A+SRP處理牙周炎根面降低內毒素含量最多。
　　實驗三:根面處理牙周炎患牙根面牙骨質對牙周膜成纖維細胞分泌細胞因子的影響
　　目的:觀察不同方法處理牙周炎患牙根面對PDLFs分泌細胞因子的影響。
　　方法:實驗二根面處置的牙周炎牙骨質片（6組）及健康牙牙骨質片與PDLFs共培養(yǎng)，ELISA檢測24h時上清液IL-

8、6、IL-8、TNF-α水平。
　　結果:(1)與SRP組比較:其余組IL-8、TNF-α含量均低于SRP組，有顯著性差異(P＜0.01）。(2)抗菌肽A+SRP組IL-6含量與健康牙組無顯著性差異(P＞0.05)。(3)除SRP組，其余根面處理組IL-8含量與健康牙組比較無顯著性差異(P＞0.05)。(4) Nd∶ YAG激光+SRP組與Er∶ YAG激光+SRP的TNF-α含量與健康牙組無顯著性差異(P＞0.05)。