前庭性血壓調(diào)控中MVN和RVLM與脊髓之間的功能聯(lián)系.pdf

1、目的：許多研究已經(jīng)證實，前庭神經(jīng)核有神經(jīng)纖維直接向腦干內(nèi)調(diào)節(jié)心血管功能的自主神經(jīng)核團投射，同時本實驗室的前期研究已經(jīng)證明，硝普鈉(sodium nitroprusside，SNP)誘發(fā)的急性低血壓時，機體內(nèi)存在由外周前庭器官-前庭內(nèi)側核、前庭神經(jīng)核-孤束核、孤束核-延髓頭端腹外側區(qū)的途徑參與繼發(fā)性的血壓調(diào)節(jié)過程。但是，在這些途徑中是否有脊髓和腎上腺髓質(zhì)的參與，尤其是前庭神經(jīng)核與脊髓、延髓頭端腹外側區(qū)與脊髓之至腎上腺髓質(zhì)的功能聯(lián)系尚無研究

2、報道，更無在這一聯(lián)系中谷氨酸的離子型受體AMPA和NMDA的作用研究。本文在去除壓力感受器的情況下，觀察了前庭神經(jīng)內(nèi)側核與脊髓、延髓頭端腹外側區(qū)與脊髓的功能聯(lián)系及其與腎上腺髓質(zhì)的關系，并初步探討了谷氨酸的部分離子型受體在這一聯(lián)系中的作用。
　　方法：首先將36只SD雄性大鼠進行頸動脈竇和主動脈弓壓力感受器去除手術，利用多道生理記錄儀觀察動物血壓壓力感受性反射敏感性，待確定手術成功后,分為阻斷劑和激動劑組。阻斷劑組又分為對照組、MK

3、-801組和CNQX組，激動劑組又分為對照組、NMDA組和 AMPA組，每組6只。利用微量泵以1μl/min流速，分別向前庭神經(jīng)內(nèi)側核和延髓頭端腹外側區(qū)注射ACSF、MK801、CNQX、NMDA、CNQX。其中阻斷劑組MK-801和CNQX的劑量是200μmol/L，激動劑組的NMDA、AMPA的劑量為100μmol/L，對照組均注射人工腦脊液（ACSF）。核團給藥后10min后，阻斷劑組靜脈注射SNP誘發(fā)急性低血壓，而激動劑組則不誘

4、發(fā)低血壓。然后用促凝管心臟取血后離心取血清，用ELASA方法測定腎上腺素或去甲腎上腺的含量，取脊髓T5段進行冰凍切片（25μm）進行免疫組化染色和蛋白印跡分析法，觀察T5段脊髓灰質(zhì)側角神經(jīng)元內(nèi)c-Fos蛋白和p-ERK1/2蛋白的表達情況。
　　結果：⑴MVN區(qū)域注射Glu受體阻斷劑CNQX或MK-801后，再誘發(fā)急性低血壓，T5段脊髓灰質(zhì)側角區(qū) c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達和血清中腎上腺素的濃度明顯少于對照組(P<0.0

5、5，n=6)。⑵MVN區(qū)域注射Glu受體激動劑NMDA或AMPA，則使T5段脊髓灰質(zhì)側角區(qū)c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達和血清中腎上腺素的濃度明顯增加，與對照組相比具有統(tǒng)計學意義。⑶RVLM區(qū)域注射Glu受體阻斷劑CNQX和MK-801后，再誘發(fā)急性低血壓使T5段脊髓灰質(zhì)側角內(nèi)c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達和血清中腎上腺素和去甲腎上腺素的濃度明顯減少，且與對照組相比較有顯著性差異。⑷RVLM區(qū)域注射Glu受體激動劑NMDA或