生物酶法制備黃粉蟲抗菌肽的研究.pdf

1、分類號(hào)!Q窆三魚：!UDC碩士學(xué)位論文生物酶法制備黃粉蟲抗菌肽的研究潘揚(yáng)昌學(xué)科專業(yè)化堂工苧指導(dǎo)教師塞!』漚靈副數(shù)援論文答辯日期20100601學(xué)位授予日期生物酶法制備黃粉蟲抗菌肽的研究摘要抗菌肽是一類分子量小、抗菌譜廣、熱穩(wěn)定性好以及抗耐藥性強(qiáng)的化合物。目前主要從昆蟲體內(nèi)提取獲得，但是得率低，沒有應(yīng)用價(jià)值。以昆蟲食品蛋白為原料，生物酶法制備抗菌肽是一種非常有效的方法。本文對(duì)生物酶法制備黃粉蟲抗菌肽進(jìn)行了研究。對(duì)比鹽提法和堿提法提取黃粉蟲

2、蛋白的優(yōu)劣，從蛋白質(zhì)純度、組成以及結(jié)構(gòu)分析入手，選擇堿提法為黃粉蟲蛋白的提取方法。堿提法最適提取條件為：NaOH濃度03％，固液比1：20，溫度40℃，時(shí)間2h，可獲得純度885％、得率為254％的黃粉蟲蛋白質(zhì)，SDSPAGE電泳表征表明該蛋白組成和脫脂蛋白相近。以抑菌活性為指標(biāo)，使用胰蛋白酶等八種酶進(jìn)行水解試驗(yàn)，確定胰蛋白酶為最佳用酶，其抑菌圈為1462mm，水解度為5511％；水解產(chǎn)物的SDSPAGE表征和掃描電鏡分析表明黃粉蟲蛋白

3、大部分已經(jīng)水解。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用三因素三水平五個(gè)中心點(diǎn)的響應(yīng)曲面方法對(duì)底物濃度Xl、酶添加量X2以及酶解時(shí)間X3進(jìn)行優(yōu)化，回歸模型為Y=150183X1018X2040X30015X1X20095XlX3014X2X3053XlzO036X22O1lX32，R2=O9967。驗(yàn)證試驗(yàn)顯示建立的回歸模型準(zhǔn)確可靠，最優(yōu)條件下抑茵圈直徑為1654mill。酶解物SECHPLC分析表明分子量小于3000Da和1000Da分別占9920％