OPG-RANK-RANKL在牙周炎與血管鈣化關(guān)系中的作用研究.pdf

1、目的：本項(xiàng)目在成功建立牙周炎血管鈣化聯(lián)合動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，研究OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)在牙周炎聯(lián)合血管鈣化大鼠動(dòng)物模型中的表達(dá)及其可能的作用。
　　方法:
　　1.SPF級(jí)雄性wistar大鼠隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組（C組）、血管鈣化組（VDN組）、牙周炎組(CP組)和牙周炎血管鈣化聯(lián)合組（CP+VDN組），并按照相應(yīng)的方法建立動(dòng)物模型。模型建立成功后,取齦溝液、血清、胸腹主動(dòng)脈及含上頜第二磨牙的上頜骨進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。牙周

2、探診深度及齦溝出血指數(shù)、牙齒頜骨聯(lián)合病理切片觀察牙周牙髓組織的改變；血管組織鈣含量測(cè)定、堿性磷酸酶活性測(cè)定及病理學(xué)觀察血管組織的改變。
　　2.OPG和RANKL在牙周組織的檢測(cè)：ELISA法和免疫組化法檢測(cè)OPG和RANKL在齦溝液和牙周牙髓組織中的表達(dá)。
　　3.OPG和RANKL在血管組織的檢測(cè)：分別采用免疫組化、熒光定量RT-PCR、Western-blot及ELISA法檢測(cè)OPG和RANKL在血管組織及血清中的表達(dá)

3、。
　　結(jié)果：
　　1.我們成功建立了牙周炎聯(lián)合血管鈣化動(dòng)物模型。
　　牙周檢查顯示：與對(duì)照組相比，CP組、VDN組和CP+VDN組均有不同程度的炎癥表現(xiàn)：
　?。?）CP組和CP+VDN組牙周探診深度和齦溝出血指數(shù)較C組和VDN組明顯增加（P＜0.05)。
　　（2）組織病理檢查發(fā)現(xiàn)CP組和CP+VDN組齦乳頭根向遷移、骨質(zhì)破壞較C組和VDN組嚴(yán)重。
　　血管組織檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：
　　（1）血管組織

4、鈣含量、堿性磷酸酶活性測(cè)定顯示VDN組、VDN+CP組顯著高于CP組、C組(P＜0.05)。
　?。?）大鼠血管組織病理檢查顯示C組無(wú)組織學(xué)形態(tài)的改變，其他三組均可見(jiàn)不同程度的中膜彈性纖維排列疏松紊亂，延展性降低。
　　2. OPG和RANKL在牙周牙髓組織的表達(dá)：
　?。?）齦溝液ELISA檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：CP、VDN組齦溝液中OPG低表達(dá)、RANKL高表達(dá)，C組和CP+VDN組OPG高表達(dá)、RANKL低表達(dá)，RANK

5、L/OPG比值在CP、VDN組高于C組和CP+VDN組，且存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），CP+VDN組與C組相比OPG、RANKL的表達(dá)及RANKL/OPG比值變化均不明顯且無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　（2）牙周組織免疫組化結(jié)果顯示：C組大鼠牙周組織OPG強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，高于其他三組； CP組、VDN組和CP+VDN組大鼠牙周組織RANKL強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，C組RANKL表達(dá)最弱；RANKL/OPG比值在CP+VDN組最高，C組最

6、低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05)。
　?。?）牙髓免疫組化結(jié)果顯示：C組大鼠牙髓組織OPG強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，CP組、VDN組和CP+VDN組大鼠牙髓組織RANKL強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，RANKL/OPG比值CP+VDN組最高，C組最低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05)。
　　3.OPG和RANKL在血管組織的表達(dá)：OPG和RANKL血清學(xué)、血管免疫組化、熒光定量PCR及Western-blot均顯示與對(duì)照組相比，CP組、VDN組OPG的表達(dá)

7、均下降，低于正常對(duì)照組（P＜0.05)，CP+VDN組OPG的表達(dá)與對(duì)照組相當(dāng)，無(wú)顯著差異（P＞0.05）； CP組、VDN組RANKL強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，CP+VDN組和C組RANKL的表達(dá)則相對(duì)較少；RANKL/OPG比值在CP組、VDN組比C組和CP+VDN組高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05)，CP+VDN組RANKL/OPG比值與對(duì)照組相當(dāng)且無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)在牙周炎與血管鈣