OPG-RANKL-RANK信號通路在PTH促進下頜骨牽張中的表達研究.pdf

1、目的：研究 OPG/RANKL/RANK信號通路在甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）促進下頜骨牽張成骨中新骨組織的影響,探索PTH調控兔下頜骨牽張成骨中的機制。
　　材料和方法：選取32只新西蘭大耳白兔行單側下頜骨牽張成骨術，以每天1mm的速度進行牽張，共牽張10天。實驗組根據(jù)給予的PTH（1-34）劑量不同分為三組：A組隔日給予20μg，B組隔日給予40μg，C組隔日給予60μg。對照組D組給予生理鹽

2、水。各組實驗動物定期抽血并在相應的固定期分別處死，取牽張側的下頜骨冷凍保存，X線片影像學分析牽張側新生成骨組織的情況，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）測定牽張期血清中核因子κB受體活化因子配基（receptor activator of NF-κ B ligand,RANKL）、骨保護素（osteoprotegerin，OPG）水平的變化，利用實時熒光定量逆轉錄聚合酶

3、鏈式反應（Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，QPCR）對比固定期時各實驗組中牽張形成的新骨中骨保護素（osteoprotegerin，OPG）,核因子κB受體活化因子配基（receptor activator of NF-κB ligand,RANKL）,腫瘤壞死因子受體相關因子6（TNFR-associated factor-6，TRAF-6），T

4、細胞胞質核心因子1（nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic1，NFATc1）的mRNA表達量的差異。
　　結果：影像學觀察中發(fā)現(xiàn)：A組、B組和C組的新生成骨組織的骨密度比對照組 D組高。血清中測定 RANKL的水平變化發(fā)現(xiàn)：牽張早期時 A組、B組和C組的值高于對照組 D組(P<0.05)；對照組 D組在牽張晚期的值比牽張早期時要高(P<0.05)。血清中測定OPG的水平變化發(fā)

5、現(xiàn)：牽張晚期時A組、B組的OPG表達量較對照組 D組的值高，各組中牽張晚期的OPG表達量顯著高于牽張早期(P<0.05)。通過對比固定期各組中的OPG,RANKL,TRAF-6, NFATc1的mRNA表達量發(fā)現(xiàn)：A組、B組和C組的OPG mRNA表達量高于對照組D組(P<0.05)。A組、B組和C組的RANKL、TRAF-6的mRNA表達量低于對照組 D組(P<0.05)，B組、C組的NFATc1的mRNA表達量低于對照組 D組(P<

6、0.05)，通過對比各組在各個時期（0周、1周、2周）的OPG,RANKL,TRAF-6, NFATc1的mRNA表達量發(fā)現(xiàn)：OPG的mRNA表達量在固定1周，2周時逐漸升高，A組、B組和C組升高的較為明顯(P<0.05)。RANKL的mRNA表達量在固定1周，2周時逐漸降低(P<0.05)，TRAF-6,NFATc1的mRNA在固定2周時降低(P<0.05)，A組、B組和C組降低的較為明顯(P<0.05)。
　　結論：1、在下頜