酮洛芬-蘭索拉唑緩釋微丸的制備以及在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、酮洛芬(KP)是一種α-芳基丙酸非甾體抗炎藥物(NSAIDs)，具有與布洛芬相似的解熱抗炎作用及更強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用。酮洛芬的作用機(jī)制主要是可逆抑制環(huán)氧合酶和脂氧合酶，以此抑制白三烯和前列腺素的生物合成，對(duì)抗炎癥和疼痛的化學(xué)介質(zhì)緩激肽而產(chǎn)生鎮(zhèn)痛、抗炎和解熱作用。臨床上，酮洛芬主要用于治療神經(jīng)痛、肌肉痛、頭痛、術(shù)后疼痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、急性痛風(fēng)等。酮洛芬普通口服制劑半衰期短(1.6～1.9 h)，臨床應(yīng)用需

2、每天頻繁給藥3～4次，且對(duì)胃腸道有刺激性，容易產(chǎn)生胃部不適、消化道潰瘍及出血等副作用。蘭索拉唑(LP)作為質(zhì)子泵抑制劑，可減輕NSAIDs產(chǎn)生的嚴(yán)重胃潰瘍及并發(fā)癥，被美國(guó)風(fēng)濕病治療指南推薦用作NSAIDs服用者的胃腸道保護(hù)劑。本文將酮洛芬與蘭索拉唑制備成緩釋微丸，按照我國(guó)化學(xué)藥品注冊(cè)分類法屬一類新藥，本課題組已申請(qǐng)中國(guó)發(fā)明專利。蘭索拉唑與酮洛芬的組合應(yīng)用，目的是減輕或消除口服酮洛芬所致的胃腸道不良反應(yīng);將其制備成微丸，可延緩?fù)宸遗c蘭索

3、拉唑的釋放以減少每日給藥次數(shù)。根據(jù)我國(guó)《藥品注冊(cè)管理辦法》中對(duì)化學(xué)藥品注冊(cè)分類及申報(bào)資料要求，本文對(duì)酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸的處方工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性和非臨床藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了初步研究，旨在為酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸的臨床前研究、臨床試驗(yàn)批件的申請(qǐng)和新藥注冊(cè)積累資料。
　　第一部分，酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸的處方工藝研究。以微丸中酮洛芬及蘭索拉唑的體外釋放度為考察指標(biāo)，采取單因素試驗(yàn)和星點(diǎn)設(shè)計(jì)效應(yīng)面優(yōu)化處方，擠出滾圓法制各緩釋微丸

4、，槳法及HPLC法測(cè)定微丸中酮洛芬及蘭索拉唑的體外釋放度。結(jié)果:最優(yōu)處方為，49.6％乙基纖維素，24.7％微晶纖維素，1.0％L-精氨酸，21.5％酮洛芬，3.2％蘭索拉唑，1.25％ HPMC溶液適量;工藝參數(shù)為，擠出速度40 r·min-1，滾圓速度600 r·min-1，滾圓時(shí)間5 min;酮洛芬及蘭索拉唑體外釋藥時(shí)間達(dá)12h以上，釋藥行為符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，釋藥過(guò)程為藥物擴(kuò)散與骨架溶蝕同時(shí)進(jìn)行。檢測(cè)自制的三批酮洛芬/蘭索拉唑緩

5、釋微丸的體外釋放度，結(jié)果均符合要求。
　　第二部分，對(duì)酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中主要指標(biāo)——含量及有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法進(jìn)行了研究。建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定微丸中酮洛芬及蘭索拉唑的含量及有關(guān)物質(zhì)。色譜條件:色譜柱為依立特Hypersil BDS C18柱(250mm×4.6 mm，5μm)，以水-乙腈-三乙胺(65∶32∶3，V/V/V)為流動(dòng)相，10％磷酸調(diào)節(jié)pH=7.0，流速為1 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，

6、柱溫25℃。結(jié)果:酮洛芬及蘭索拉唑的主峰與其有關(guān)物質(zhì)和破壞后的降解物質(zhì)可以完全分離;酮洛芬濃度在40～160μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，回收率為100.00％(n=9)，檢測(cè)限為3.4 ng，定量限為20.0 ng;蘭索拉唑濃度在6～24μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，回收率為99.91％(n=9)，檢測(cè)限為6.7 ng，定量限為60.0 ng。采用不加校正因子的自身對(duì)照法測(cè)定酮洛芬與蘭索拉唑的有關(guān)物質(zhì)。按照

7、建立的含量及有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法，檢測(cè)自制的3批酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸樣品，結(jié)果酮洛芬的平均含量為100.82％，蘭索拉唑的平均含量為98.93％，有關(guān)物質(zhì)量均小于2.0％。該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、靈敏度高，適用于酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸的含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)檢查。
　　第三部分，酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸的穩(wěn)定性研究。對(duì)三批酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸進(jìn)行影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)研究。酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸在強(qiáng)光照射和高溫試

8、驗(yàn)條件下，微丸的外觀和主藥含量呈下降的趨勢(shì)，但并未影響體外釋放速度。故微丸在包裝、儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)注意避光和儲(chǔ)存溫度不宜過(guò)高。微丸在高濕條件下較穩(wěn)定，外觀、含量及其體外釋放速度均未出現(xiàn)變化。在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下，該微丸的穩(wěn)定性較好，外觀、含量、有關(guān)物質(zhì)及體外釋放度指標(biāo)均沒(méi)有發(fā)生顯著變化，微丸在長(zhǎng)期試驗(yàn)中的穩(wěn)定性還在繼續(xù)考察中。
　　第四部分，酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸在SD大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。以自制的相同含量規(guī)格的酮洛

9、芬/蘭索拉唑普通膠囊為參比制劑，研究酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸在SD大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，并采用Kinetica藥物代謝動(dòng)力學(xué)軟件分析血藥濃度數(shù)據(jù)，計(jì)算出藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及相對(duì)生物利用度。結(jié)果顯示，受試制劑和參比制劑酮洛芬的AUC0～24分別為39.11μg/mL·h和36.91μg/mL·h，Cmax分別為2.80μg/mL和4.62μg/mL;蘭索拉唑的AUC0～24分別為10.99μg/mL·h和9.24μg/mL·h，Cmax分別為

10、1.20μg/mL和1.51μg/mL。以AUC0～24計(jì)算，酮洛芬/蘭索拉唑緩釋微丸中酮洛芬和蘭索拉唑的相對(duì)生物利用度分別為106.94％和118.94％。參考有關(guān)文獻(xiàn)，以1.0μg·mL-1為酮洛芬的最低有效血藥濃度，該微丸中酮洛芬在大鼠體內(nèi)高于最低有效血藥濃度時(shí)間為24小時(shí)，比其普通膠囊在大鼠體內(nèi)作用時(shí)間（12小時(shí)）延長(zhǎng)12小時(shí);以0.4μg/mL為蘭索拉唑的最低有效血藥濃度，該微丸中蘭索拉唑在大鼠體內(nèi)高于最低血藥濃度的時(shí)間比其普