乙酰氨基糖和唾液酸的柱前衍生HPLC-FLD(UV)-MS分析.pdf

1、隨著對糖生物學活性和生理功能研究的不斷深入，糖類研究成為近年來的一個研究熱點。高效液相色譜（HPLC）及其聯用技術由于具有快速、靈敏、準確、高效、自動化程度高等特點，已經成為糖類物質分析的重要方法之一。雖然糖類的HPLC分析方法已經有大量報導，但是這些方法大多數是針對普通單糖進行分析檢測。糖類衍生物（如N-乙酰葡萄糖胺、唾液酸等）具有多樣性的結構和獨特的生物學活性，它們大多數與人體內某些生理活動和功能相關聯，因此受到了越來越多的關注。然

2、而，對糖類衍生物的高靈敏分析檢測方法鮮見報道。目前糖類衍生物的分析檢測主要存在兩大難題：分離困難和檢測靈敏度低。為了解決兩大難題，本論文采用高靈敏衍生試劑（熒光或紫外）柱前衍生化處理使糖分子變成帶有發(fā)色基團的物質，改變其分子結構，從而有利于色譜分離及紫外或熒光的高靈敏檢測，提高分離程度及檢測靈敏度。該課題重點研究了幾種糖衍生物的提取方法和檢測方法，建立了多種生物樣品中糖衍生物的檢測方法。主要研究內容如下：
　　第一章：簡述糖類分析

3、的現狀。介紹糖類的生物活性及分析難點，高效液相色譜技術在糖類研究中的應用，糖類衍生化分析發(fā)展概況。
　　第二章：利用1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮（NMP）作為柱前衍生試劑，建立高效、靈敏檢測多種乙酰氨基糖（N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰神經氨酸、N-羥乙酰神經氨酸）的高效液相色譜分離檢測方法，通過對樣品水解條件的優(yōu)化，該方法成功應用于蕨麻樣品和奶制品樣品中乙酰氨基糖含量的測定。
　　第三章：建立了一

4、種新型血清唾液酸的熒光檢測方法。采用2-[2-(7H-二苯并[a，g]咔唑-乙氧基)-乙基肼基甲酸酯（DBCEEC）對唾液酸進行標記，建立高效、靈敏的高效液相色譜—質譜（HPLC-MS）方法，并成功用于人體血液中唾液酸的檢測。通過質譜鑒定結構解釋了該類衍生反應的原理，對衍生條件和唾液酸水解條件通過響應面進行優(yōu)化，對比了正常體內血清和癌癥病人血清中唾液酸的含量變化。
　　第四章：合成金屬—有機骨架材料（UiO-66-NH2）作為吸附