發(fā)育信號SHH誘導(dǎo)恒河猴骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的信號機(jī)制研究.pdf

1、針對骨髓干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化中存在的關(guān)鍵問題——細(xì)胞發(fā)育和命運(yùn)決定中的信號調(diào)控機(jī)制不明確，研究神經(jīng)發(fā)育調(diào)控因子Shh誘導(dǎo)的恒河猴骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中，SHH信號系統(tǒng)和MAPK激酶系統(tǒng)的信號通路，深入探討其調(diào)控機(jī)制。研究結(jié)論如下: 1.建立了體外培養(yǎng)擴(kuò)增恒河猴骨髓MSCs的簡便、穩(wěn)定、高效的方法，證實(shí)所分離的細(xì)胞為骨髓MSCs，具有較強(qiáng)的增殖潛能，均一性較好，純度較高，說明MSCs是一種較為理想的種子細(xì)胞。

2、 2.建立了一種新的Shh誘導(dǎo)方案，成功誘導(dǎo)MSC向神經(jīng)樣細(xì)胞分化，分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物Nestin，神經(jīng)元標(biāo)志物NSE,NF-M,Tau、突觸素和膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP。證實(shí)RA誘導(dǎo)方案能夠誘導(dǎo)MSC向神經(jīng)樣細(xì)胞分化，表達(dá)Nestin},NSE,NF-M,Tau、突觸素和GFAP，兩種方案沒有發(fā)現(xiàn)顯著效率差異。但Shh能夠誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)典型少而長的軸突形態(tài)。免疫組化與電鏡證據(jù)均表明，本文建立的Shh誘導(dǎo)方案是一種有效的神經(jīng)誘導(dǎo)

3、方案。 3.Shh誘導(dǎo)方案通過持續(xù)激活特異性受體ptc途徑參與MSC向神經(jīng)樣細(xì)胞分化。RA誘導(dǎo)方案通過短暫激活選擇性受體RAR途徑參與細(xì)胞分化，而后這一反應(yīng)可能被反饋抑制，其深入機(jī)制有待進(jìn)一步研究。Shh與RA兩種誘導(dǎo)方案之間沒有顯著受體途徑交叉。 4.MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與Shh誘導(dǎo)MSC分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的信號傳遞，p38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活，ERK1/2信號通路被抑制;p38信號傳遞系統(tǒng)抑制劑SB203580可使MS