魚類白細胞介素4的基因克隆和表達分析.pdf

1、本文成功克隆了河豚IL-4 cDNA全序列，并在畢赤酵母系統(tǒng)中誘導(dǎo)表達了重組IL-4。河豚IL-4 cDNA：全長834bp，包括39bp的5'非編碼區(qū)(5'UTR)，375bp的3'非編碼區(qū)(3'UTR)和420bp的開放閱讀框架(ORF)，其翻譯得到的多肽含139個氨基酸，預(yù)測分子量約16.131kDa。河豚IL-4基因與已知的哺乳動物和鳥類有相同的結(jié)構(gòu)，即由四個外顯子和三個內(nèi)含子組成。它的編碼蛋白與其他同源體有11％-16％的同源

2、相似性。用優(yōu)化條件的RT-PCR半定量估測IL4在河豚各個組織中的表達水平，結(jié)果顯示，IL-4在所選組織中均為組成性表達，包括頭腎、脾臟、肝臟、大腦、鰓、肌肉和心臟，其中頭腎、脾臟和肝臟的表達量較低。IL-4的組成性表達與它對免疫細胞因子調(diào)節(jié)的潛在作用是相一致的。用2 μ g ConA、2 μ g PHA和2μg PMA的混合誘導(dǎo)劑刺激河豚，可以發(fā)現(xiàn)IL-4在以上所檢測組織中的表達量顯著上升，這一結(jié)果也預(yù)示了有絲分裂原激活I(lǐng)L-4的炎癥