機械壓力對體外培養(yǎng)大鼠髁突軟骨與股關(guān)節(jié)軟骨細胞Ⅱ型膠原合成的影響研究.pdf

1、目的：在體外培養(yǎng)的髁突軟骨細胞和股關(guān)節(jié)軟骨細胞基礎(chǔ)上，加載一定時間的壓力，比較兩種軟骨細胞Ⅱ型膠原的合成，從細胞外基質(zhì)成分方面探索壓力對不同關(guān)節(jié)軟骨細胞的影響差異，利用關(guān)節(jié)軟骨生物力學(xué)特性對治療骨關(guān)節(jié)病或錯頜畸形等疾病的關(guān)節(jié)軟骨重建或改建的方法進行初步探討。
　　 方法：通過機械加酶聯(lián)合消化法，將2周齡的SD雄性大鼠來源的髁突軟骨和股關(guān)節(jié)軟骨細胞分離并體外單層培養(yǎng)，建立其分別的有限細胞系，用Ⅱ型膠原的免疫組化來鑒定關(guān)節(jié)軟骨細胞。

2、對兩種第三代軟骨細胞加載0.01MPa的靜壓力，實驗壓力加載時間分為0.5h，3h，12h，以兩種細胞分別加載以上不同的壓力時間為實驗組，對照組的軟骨細胞不進行壓力的加載，除了加力時間不同外，其余實驗條件均相同。用逆轉(zhuǎn)錄PCR的方法檢測各標本Ⅱ型膠原的表達，統(tǒng)計學(xué)分析，用t檢驗，比較各組數(shù)據(jù)間的統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：在0.01MPa靜壓力下，加力0.5h后，髁突軟骨細胞和股關(guān)節(jié)軟骨細胞Ⅱ型膠原表達略有增加，對照組也有少量增加

3、，三者無明顯差別；加力3h后，髁突軟骨細胞和股關(guān)節(jié)軟骨細胞分別與對照組相比，均有明顯Ⅱ型膠原表達的增高，且與對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)差異，而髁突軟骨細胞與股關(guān)節(jié)軟骨細胞之間的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義，髁突軟骨細胞Ⅱ型膠原比股關(guān)節(jié)軟骨細胞的表達略高；加力12h后，髁突軟骨細胞和股關(guān)節(jié)軟骨細胞分別與對照組比較，都有顯著地Ⅱ型膠原表達降低(p＜0.05)，且髁突軟骨細胞下降趨勢高于股關(guān)節(jié)軟骨細胞，但這兩者間的比較結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 結(jié)論