線粒體DNA多態(tài)的變性高效液相色譜分析及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究.pdf

1、目的:建立新的mtDNA多態(tài)遺傳標(biāo)記的變性高效液相色譜檢測(cè)技術(shù),為法醫(yī)學(xué)疑難檢材的檢測(cè)提供新的技術(shù)手段;利用變性高效液相色譜技術(shù),尋找適合作為法醫(yī)遺傳標(biāo)記的mtDNA編碼區(qū)多態(tài)遺傳標(biāo)記,以期提高mtDNA在法醫(yī)學(xué)檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值.方法:應(yīng)用primer3引物設(shè)計(jì)軟件,對(duì)mtDNA控制區(qū)和編碼區(qū)分別設(shè)計(jì)引物,用以進(jìn)行PCR擴(kuò)增.通過(guò)構(gòu)建DNA池及樣本間兩兩比較的方法,確定DHPLC發(fā)現(xiàn)異源雙鏈的效能,從而建立mtDNA多態(tài)分析的DHPLC

2、方法.用建立的方法,在成都漢族群體120名無(wú)關(guān)個(gè)體中,對(duì)mtDNA編碼區(qū)各基因座進(jìn)行多態(tài)性研究,獲得等位基因及單倍型頻率、變異度及標(biāo)準(zhǔn)誤,并進(jìn)行種屬特異性、組織同一性以及陳舊骨骼、毛干等法醫(yī)學(xué)疑難檢材的DHPLC分析.結(jié)論:該課題成功的建立了對(duì)mtDNA控制區(qū)高識(shí)別力基因座進(jìn)行快速法醫(yī)學(xué)檢測(cè)的DHPLC方法.實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)的快速、經(jīng)濟(jì)與高效,有望成為今后法醫(yī)學(xué)mtDNA檢測(cè)的重要技術(shù);成功的建立了利用DHPLC技術(shù)分析mtDNA編碼區(qū)多態(tài)的