大黃對(duì)充血性心力衰竭的療效及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　心力衰竭是多種心血管系統(tǒng)疾病的終末階段，具有較高的致死率，目前針對(duì)心力衰竭的治療主要以藥物治療為主，大黃作為我國傳統(tǒng)中藥，其新的治療效用不斷被開發(fā)，是新近的研究熱點(diǎn)所在，有研究報(bào)道大黃對(duì)心力衰竭具有一定的保護(hù)作用，本研究目的在于探究大黃對(duì)充血性心力衰竭的臨床療效及其治療機(jī)理。
　　方法:
　　本研究采用臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，通過大黃對(duì)充血性心力衰竭患者的臨床治療，觀察其治療效果;通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探究其可能存在

2、的作用機(jī)理，全文實(shí)驗(yàn)共分為四部分:①大黃對(duì)充血性心力衰竭保護(hù)機(jī)制臨床研究。本研究選用2014-2015年度鄭大二附院收治的心衰患者作為研究對(duì)象。對(duì)照組用藥:采用常規(guī)西藥治療;治療組用藥:在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合大黃水煎液，每日上午10點(diǎn)給藥，給藥劑量按生大黃計(jì)10g/人/天，14天為一個(gè)治療周期。在治療一個(gè)周期后，分別測(cè)定治療組及對(duì)照組，心臟超聲指標(biāo):左室舒張末期內(nèi)徑(leftventricular end-diastolic dimen

3、sion，LVEDD)、左室心搏量(left ventricular strokevolume，LVSV)及左室射血分?jǐn)?shù)(Left ventricular ejection fraction，LVEF);B型尿鈉肽(brain natriuretic peptide，BNP)水平:腎素-血管緊張素-醛固酮(renin-angiotensin-aldosteronesystem，RAAS)系統(tǒng)相關(guān)指標(biāo):血管緊張素Ⅱ(Angiotensin

4、Ⅱ，AngⅡ)、醛固酮(aldosterone，ALD)含量及腎素(panel reactive antibodies，PRA)活性變化;測(cè)定血漿白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)含量的變化。②大黃對(duì)心力衰竭模型大鼠心功能和BNP的影響及機(jī)制研究。采用阿霉素制備心力衰竭大鼠模型。將大鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和大黃高、中、低劑量組(

5、50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)?？瞻讓?duì)照組每天腹腔注射生理鹽水0.3 ml，灌胃生理鹽水0.3 ml;模型對(duì)照組每天腹腔注射阿霉素10 mg/kg，灌胃生理鹽水0.3 ml;大黃低、中、高三劑量組大鼠每天灌胃大黃溶液0.3 ml(大黃濃度分別為50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)，同時(shí)腹腔注射阿霉素10 mg/kg，給藥21天。心臟彩超測(cè)定左室舒張末期內(nèi)徑(left ventricula

6、r end systolic dimension,LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(leftventricular end diastolic dimension, LVESD)及LVEF;酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血漿BNP水平;利用放射免疫分析法測(cè)定血漿及心肌組織中AngⅡ含量。③大黃對(duì)心力衰竭模型大鼠氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)的影響及其機(jī)制。阿霉素制備心力衰竭大鼠模型。將大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和大黃高、中、低劑量組(50 mg/kg、1

7、00 mg/kg和200 mg/kg))。正常對(duì)照組每天腹腔注射生理鹽水0.3 ml，灌胃生理鹽水0.3 ml;模型對(duì)照組每天腹腔注射阿霉素10 mg/kg，灌胃生理鹽水0.3 ml;大黃低、中、高三劑量組大鼠每天灌胃大黃溶液0.3 ml(大黃濃度分別為50mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)，同時(shí)腹腔注射阿霉素10 mg/kg，給藥21天。Western blot法測(cè)定心肌組織超氧化物歧化酶(Superoxide Di

8、smutase，SOD)表達(dá)水平;雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血漿SOD、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、TNF-α、IL-6和C-反應(yīng)蛋白(C-reactionprotein，CRP)的濃度，電泳遷移率變動(dòng)分析(eleetrophoretiemobilityshiftassays，EMSA)法測(cè)定NF-kB活性。④大黃對(duì)充血性心力衰竭模型大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響。心力衰竭大鼠模型采用腹主動(dòng)脈縮窄法制備。將受試動(dòng)物隨機(jī)分為

9、模型組、假手術(shù)組、大黃高、中、低劑量組(50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg))，每組20只，術(shù)后4周開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥8周。模型組給予同體積生理鹽水，假手術(shù)組不進(jìn)行藥物干預(yù)。TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡情況;酶聯(lián)免疫法測(cè)定心肌組織炎性因子TNF-α及IL-6含量; EMSA法測(cè)定NF-kB活性，蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)法測(cè)定Bcl-2、Bax蛋白表達(dá);RT-PCR法測(cè)定Bcl-2、Bax、Caspase-3

10、的mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　①心衰患者在常規(guī)西藥治療的基礎(chǔ)上加用大黃后，LVEF、LVSV升高、LVEED降低;BNP、AngⅡ、ALD含量及PRA活性顯著下降; TNF-α及IL-6含量降低;患者心功能得到改善。②模型組大鼠較正常對(duì)照組大鼠LVEDD、LVESD顯著增大，LVEF減小，BNP和AngⅡ水平顯著上升。將大黃應(yīng)用于模型大鼠，大鼠LVEDD、LVESD減小，LVEF增大，BNP和AngⅡ水平顯著下降，并

11、在一定劑量范圍內(nèi)具有劑量依賴性。③模型組大鼠較正常對(duì)照組大鼠MDA、TNF-α、IL-6、CRP和NF-κB水平顯著上升，SOD活性顯著下降。將大黃應(yīng)用于心力衰竭大鼠，大鼠MDA、TNF-α、IL-6、CRP和NF-κB水平顯著下降，SOD活性顯著上升，并具有一定的劑量依賴性。④大黃干預(yù)后大鼠體內(nèi)炎性因子的水平顯著降低;NF-kB蛋白活性受到抑制，Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表達(dá)減少，Bcl-2蛋白及mRNA表達(dá)增加，心肌細(xì)

12、胞凋亡率降低。
　　結(jié)論:
　?、俅簏S水煎液對(duì)充血性心力衰竭患者具有較好的治療和保護(hù)作用，能改善患者心功能，減輕左心室擴(kuò)大程度，部分逆轉(zhuǎn)左心室重構(gòu)。其作用機(jī)制可能與降低體內(nèi)炎性因子水平、抑制腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的激活有關(guān)。②大黃具有抑制心衰大鼠左心室擴(kuò)大、降低大鼠血漿BNP水平，提高大鼠左心室收縮功能的功效，作用機(jī)制之一可能與其抑制RAAS系統(tǒng)活性有關(guān)。③大黃可能通過抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)和通過抑制NF-κB通路激活，進(jìn)而