基于核酸短暫雜交和Lambda核酸外切酶的單堿基突變檢測(cè)方法的探究.pdf

1、DNA動(dòng)態(tài)過(guò)程的精確設(shè)計(jì)依賴(lài)于生物物理學(xué)方法和動(dòng)態(tài)DNA納米技術(shù)。作為最簡(jiǎn)單的動(dòng)態(tài)DNA結(jié)構(gòu)，短DNA雙鏈(9-12nt)構(gòu)成短暫雜交方式，可用于超分辨成像和體外檢測(cè)。核酸底物上的核酸酶活性使得在分析化學(xué)和動(dòng)態(tài)DNA納米技術(shù)中的各種應(yīng)用成為可能。核酸外切酶在細(xì)胞生物學(xué)中起著至關(guān)重要的作用，并以準(zhǔn)確的方式操控核酸。研究動(dòng)態(tài)底物與核酸外切酶的相互作用有助于開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)設(shè)計(jì)特殊的分子行為并將動(dòng)態(tài)DNA納米技術(shù)轉(zhuǎn)移到活細(xì)胞中。
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2、mbda核酸外切酶不僅用于PCR產(chǎn)物處理，也是DNA分析方法與納米技術(shù)的衡量工具，由于其對(duì)錯(cuò)配的敏感性而受到廣泛應(yīng)用，然而其單核苷酸選擇性并不高，受DNA納米技術(shù)中用于提高特異性的動(dòng)態(tài)探針的啟發(fā),將熒光測(cè)驗(yàn)和單分子熒光分析相結(jié)合，利用Lambda核酸外切酶來(lái)探究它對(duì)短雙鏈DNA的單堿基選擇性。熒光測(cè)量結(jié)果表明，即使長(zhǎng)度小于酶足跡，短dsDNA也可被有效地消化，并且降解速率表現(xiàn)出高的單核苷酸選擇性。單分子分析表明，完全匹配(PM)底物可以