鴨肝組織巨噬細(xì)胞在發(fā)育過程及病毒感染后的變化及其意義.pdf

1、肝巨噬細(xì)胞是單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成部分，同時(shí)也是機(jī)體內(nèi)最大的吞噬細(xì)胞亞群。巨噬細(xì)胞不僅具有強(qiáng)大的非特異性吞噬功能，可以清除肝組織中的細(xì)胞碎片和各種抗原性物質(zhì)，同時(shí)也可以參與特異性免疫應(yīng)答，具有抗病毒感染、細(xì)菌感染和抗腫瘤免疫等多種功能。禽類的肝與哺乳動(dòng)物的相比存在很大差異，鴨在孵出早期肝中含有大量脂質(zhì)，隨著日齡的增加，脂質(zhì)含量逐漸減少，鴨肝的這種特點(diǎn)可能導(dǎo)致發(fā)育過程中巨噬細(xì)胞分型的差異。不同年齡的鴨對(duì)許多病原的耐受能力不同，如DHA

2、V-1、鴨細(xì)小病毒和許多毒素等均可以造成雛鴨的嚴(yán)重病變反應(yīng)或致死，但對(duì)成年鴨并不致病。本研究欲通過對(duì)發(fā)育過程鴨肝巨噬細(xì)胞的極化變化觀察，為解釋上述差異提供依據(jù)。本研究的主要工作如下:
　　1.鴨發(fā)育過程中肝巨噬細(xì)胞變化
　　剖殺1、4、10、21和35日齡鴨，取肝組織，一部分進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察并進(jìn)行陽性細(xì)胞含量統(tǒng)計(jì)，另一部分提取RNA，通過熒光定量PCR分析M1和M2型巨噬細(xì)胞基因的表達(dá)量變化。結(jié)果顯示:隨日

3、齡逐漸增加，鴨肝組織中脂質(zhì)含量減少，肝巨噬細(xì)胞在發(fā)育過程中主要表現(xiàn)為M2型，M1型巨噬細(xì)胞除1日齡時(shí)含量較高外，后期發(fā)育過程呈較低水平，M2型含量較高且數(shù)量穩(wěn)定。結(jié)果表明，正常狀態(tài)下，肝組織中巨噬細(xì)胞主要表現(xiàn)為M2表型，但機(jī)體受外界刺激后，M1型巨噬細(xì)胞會(huì)大量增加，促進(jìn)炎癥反應(yīng)。
　　2.鴨感染DHAV-1后巨噬細(xì)胞極化類型變化
　　本研究利用DHAV-1分別感染4、10、21和35日齡鴨，感染后36h放血剖殺取肝組織，一部

4、分進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察并進(jìn)行陽性細(xì)胞含量統(tǒng)計(jì)，另一部分提取RNA，檢測(cè)M1和M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)量變化。結(jié)果顯示:4日齡雛鴨感染后肝內(nèi)M1型巨噬細(xì)胞含量最多，M2型含量最少，而大日齡鴨感染后M1型巨噬細(xì)胞含量減少，M2型巨噬細(xì)胞10日齡鴨感染后最多，而后逐漸減少。結(jié)果表明:不同日齡鴨感染病毒后肝巨噬細(xì)胞極化方向不同，肝組織中脂質(zhì)較多時(shí)，巨噬細(xì)胞更多的向M1極化類型極化，導(dǎo)致肝組織過度的炎性反應(yīng)，因此造成雛鴨嚴(yán)重病變甚

5、至死亡。我們推測(cè):肝中脂肪含量可能會(huì)影響巨噬細(xì)胞的極化分型。
　　此外，本研究對(duì)4日齡鴨感染DHAV-1后12、24、36、48、72、144h及17d的鴨進(jìn)行放血剖殺取肝組織，試驗(yàn)方法同上。在感染前24h，組織未出現(xiàn)明顯病變時(shí)，M1型巨噬細(xì)胞含量較為穩(wěn)定，當(dāng)肝組織爆發(fā)炎癥反應(yīng)M1型巨噬細(xì)胞也隨之爆發(fā)性增長(zhǎng)，隨著病變減少炎性反應(yīng)減弱，M1型巨噬細(xì)胞也逐漸減少，變化趨勢(shì)與病毒含量變化相似。M2型巨噬細(xì)胞數(shù)量大致與M1型巨噬細(xì)胞呈相反

6、趨勢(shì)，在感染后期，伴隨膽管上皮增生，數(shù)量逐漸增加。結(jié)果表明，肝中巨噬細(xì)胞在急性損傷過程中，M1極化型的作用為促進(jìn)炎性反應(yīng)和吞噬病原體的作用，而M2極化型主要為促增生和修復(fù)的作用。
　　綜合上述研究結(jié)果，與哺乳動(dòng)物相似，家禽肝中M1型巨噬細(xì)胞的主要作用是急性感染過程中的抗病原體和促進(jìn)炎癥反應(yīng)作用，M2型巨噬細(xì)胞抑制炎癥反應(yīng)，促進(jìn)修復(fù)。雛鴨肝中大量脂質(zhì)的存在，影響肝內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬能力，可能是造成雛鴨與成年鴨對(duì)DHAV-1耐受性不同的主