microRNAs在膝骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中表達(dá)譜的差異性研究.pdf

1、目的：運(yùn)用基因芯片技術(shù)檢測膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎患者(Knee Osteoarthritis,KOA）關(guān)節(jié)液中microRNA的表達(dá)譜系，篩選出與正常人呈差異性表達(dá)的miRNAs，對(duì)部分表達(dá)差異顯著的miRNAs進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量PCR(RealTime quantitative PCR,RT qPCR)驗(yàn)證。本研究擬通過分析KOA患者關(guān)節(jié)液中miRNAs的表達(dá)情況，找出對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎早期診斷和治療有意義的miRNAs。
　　方法：
　

2、　1.收集4例不同嚴(yán)重程度的OA患者和2例健康正常人的關(guān)節(jié)液，使用Trizol法提取RNA后，運(yùn)用Affymetrix miRNA2.0基因芯片檢測2組OA患者和正常人關(guān)節(jié)液中miRNAs的表達(dá)譜系，聚類分析軟件(cluster3.0)分析差異性表達(dá)的miRNAs。
　　2.運(yùn)用RT-qPCR方法對(duì)表達(dá)具有顯著差異性的miRNAs進(jìn)行驗(yàn)證，挑選出豐度高且變化顯著的miRNAs。
　　結(jié)果：
　　1.OA患者關(guān)節(jié)液中有1

3、3個(gè)miRNA呈顯著差異性表達(dá)，其中miR-145，miR-22，miR-9，miR-155，miR-34c等5個(gè)明顯上調(diào)。miR-582-3p，miR-146a（晚期），miR-1227，miR-634，miR-576-5p，miR-641，miR-140，miRNA-125b等8個(gè)明顯下調(diào)。
　　2.與正常人比較，OA患者關(guān)節(jié)液中miR-22、miR-9表達(dá)上調(diào)，差異均有顯著性意義(p<0.05), miR-140，miR-1