苯達(dá)莫司汀在中國人群中藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)研究及SLC22A1、CYP1A2、GSTA1基因單核酸多態(tài)性與其血藥濃度相關(guān)性分析.pdf

1、目的：研究苯達(dá)莫司汀在中國人群（B細(xì)胞惰性淋巴瘤患者）中藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)特性，并分析與苯達(dá)莫司汀轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝相關(guān)基因SLC22A1、CYP1A2、GSTA1的SNP對其血藥濃度的影響。
　　方法：1.采用超高效液相串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）建立測定苯達(dá)莫司汀血藥濃度方法，并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，包括考察方法的專一性、準(zhǔn)確度、精密度、基質(zhì)效應(yīng)、回收率、樣品穩(wěn)定性、稀釋效應(yīng)。2.按入選、排除標(biāo)準(zhǔn)，篩選14位在天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院接受治

2、療的B細(xì)胞惰性淋巴瘤患者進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究。受試者按照120 mg/m2/d,第1天和第2天給藥，以21天為一個(gè)周期。靜脈滴注時(shí)長120分鐘。用藥第一天于靜脈滴注前（0 h）和滴注開始后1 h、2 h，滴注完成后5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、4 h、6 h、8 h從靜脈采血4.0 ml。靜脈血以肝素鈉抗凝后，在3000 r/min，4℃條件下離心4 m

3、in，血漿置于-80℃冰箱中冷凍保存待測。UPLC-MS/MS法測定苯達(dá)莫司汀血藥濃度，應(yīng)用 DAS2.0軟件計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。3.按入選、排除標(biāo)準(zhǔn)，篩選21位受試者進(jìn)行Ⅱ期研究（其中5位受試者用藥一周期后，停止用藥，退出臨床試驗(yàn)），用藥6周期后采用RECIST標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)苯達(dá)莫司汀藥效。同時(shí)，將給藥方案調(diào)整為靜脈滴注4h；在給藥結(jié)束時(shí)、第二次給藥前采集血樣，測定苯達(dá)莫司汀血藥濃度。4.使用QIAamp血液DNA提取試劑盒提取 DNA，采

4、用 PCR-直接測序法檢測 SLC22A1（ rs200684404， rs4646277，rs2282143，rs628031，rs35167514，rs622342）、CYP1A2（rs762551, rs2069514, rs2470890，rs2472304，rs12720461）、GSTA1（rs3957356，rs3957357）的多態(tài)性。采用SPSS19.0軟件統(tǒng)計(jì)分析SNP與苯達(dá)莫司汀血藥濃度之間的關(guān)系。
　　結(jié)果

5、：1.建立了UPLC-MS/MS法測定苯達(dá)莫司汀血藥濃度。其專一性、準(zhǔn)確度、精密度、基質(zhì)效應(yīng)、回收率、樣品穩(wěn)定性、稀釋效應(yīng)均符合藥代動(dòng)力學(xué)研究要求。血漿苯達(dá)莫司汀濃度在5~1000ng·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r2=0.9981)，定量下限為5 ng·mL-1，日內(nèi)和日間精密度(RSD)均小于12.17％，準(zhǔn)確度為91.39%~99.60%;提取回收率和基質(zhì)效應(yīng)分別為102.70%~104.77%和84.82%~91.77%。2.單

6、次靜脈滴注鹽酸苯達(dá)莫司汀120 mg/m2/d，滴注時(shí)長120 min；主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：Cmax為4822.571±3477.123 ng·mL-1；CL為25.75±15.198 L/h/m2； t1/2為0.388±0.157 h； AUC(0-∞)為6463.691±3859.084 ug/L*h。3.Ⅱ期16例受試者進(jìn)行療效評價(jià)結(jié)果：鹽酸苯達(dá)莫司汀以120 mg/m2/d,第一天、第二天給藥，以21天為一個(gè)周期，滴注時(shí)長為4

7、 h,療效CR為12.5%、PR為50.0%、SD為18.8%、PD為18.8%。4. SNP分型結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有SLC22A1(rs683369、rs2282143、rs628031、rs622342)， CYP1A2(rs762551、rs2069514、rs2472304、 rs2470890)存在多態(tài)性。我們并未發(fā)現(xiàn)SNP與苯達(dá)莫司汀血藥濃度存在相關(guān)性。
　　結(jié)論：1.已建立的檢測苯達(dá)莫司汀血藥濃度UPLC-MS/MS方法滿足