寧夏地區(qū)犢牛腹瀉性大腸桿菌的分型鑒定及其主要毒力基因檢測.pdf

1、為有效應(yīng)對寧夏地區(qū)犢牛腹瀉性疾病，研究寧夏地區(qū)犢牛腹瀉性大腸桿菌優(yōu)勢血清型的分布與主要毒力基因。本課題于2015年3月至2015年12月間采集和接檢寧夏區(qū)內(nèi)因腹瀉致死的犢牛組織樣32頭份，包括心、肝、脾、肺、腎和腸淋巴結(jié)共118份組織樣;腹瀉犢牛糞樣86頭份，共計204份樣品，涉及118頭腹瀉犢牛。經(jīng)微生物培養(yǎng)法、生化鑒定法和16S rDNA鑒定法，共計分離得到114株大腸桿菌，其中來自于組織樣的有52株，來自于糞樣的有62株。

2、　　1、共選擇34種大腸桿菌O抗原標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行分型鑒定，結(jié)果顯示:114株大腸桿菌所含血清型有O26、O138、O126、O51、O92、O107、O68、O86、O35、O13、O55、O8、O142、O91、O137、O144、O153、O18、O20、O101、O158、O22、O93、O148、O117、O109、O9、O15、O53共計29種血清型86株定型株，總檢出率為75.43％;另O10、O112、O7、O128、O43

3、五種血清型未能檢出。依比例確定優(yōu)勢血清型為O26(6/114)、O126(5/114)、O18(9/114)、O35(4/114)、O158(8/114)、O101(6/114)、O107(5/114)、O9(5/114)共計48株，占參與分型菌株的42.11％，占定型菌株的55.81％;其中源于組織樣的定型株有37株，來源于糞樣的定型株有49株，另有28株未鑒定出血清型。
　　2、針對48株優(yōu)勢定型株分別進(jìn)行fimh、afa、e

4、ae、ehly、ipah和f41六種毒力基因檢測。檢測結(jié)果顯示:含fimh基因的菌株達(dá)32株，占參與分析株比例的66.67％;含afa毒力基因的菌株有8株，占參與分析株比例的16.67％;含eae毒力基因的菌株有5株，占參與分析株比例的10.41％;同時存在fimh與afa基因的菌株有2株;其他3種毒力基因均未檢測到。
　　3、對部分菌株毒力基因的PCR產(chǎn)物測序后結(jié)果顯示:所測fimh、eae及afa的基因序列與GenBank公開