納米空心羥基磷灰石-氯磷酸二鈉對重癥胰腺炎大鼠肺泡巨噬細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatitis，SAP)是常見的外科急腹癥，常伴有全身炎癥反應(yīng)綜合癥(systemicinflammatoryresponsesyndrome，SIRS)、感染、休克、多器官功能衰竭(multipleorgandysfunctionsyndrome，MODS)，導(dǎo)致病人死亡。研究發(fā)現(xiàn)肺泡巨噬細(xì)胞(Alveolarmacrophages，AM)在SAP時急性肺損傷(acutelungi

2、njury，ALI)的過程中起了重要作用。本研究探討空心羥基磷灰石(hydroxylapatite，HAP)作為clodronate的載體對SAP合并ALI時AM凋亡的影響。
　　 方法:合成空心HAP以及HAP-clodronate并進(jìn)行了表征。將SD大鼠隨機(jī)分為SAP組(C)、SAP+HAP組(P)、SAP+HAP-clodronate組(T)，每組8只。氯胺酮(2mg/kg)肌肉注射進(jìn)行麻醉。采用腹胰腺被膜下均勻注射5％牛

3、磺膽酸鈉(4ml/kg)制作SAP模型，6h后處死動物，分離出全肺后及胰腺，用于病理檢查。利用肺泡灌洗液，經(jīng)差時貼壁法，分離、純化，并進(jìn)行原代培養(yǎng)，用蘇木素、AO/EB熒光染色對所分離的細(xì)胞進(jìn)行凋亡鑒定及計算凋亡率。
　　 結(jié)果:所制備的粒徑約50nm空心橢圓形HAP納米粒子，對clodronate有較高的載藥率，達(dá)到87.32％。獲得的AM形態(tài)正常，經(jīng)臺盼藍(lán)染色，細(xì)胞存活率＞95％。細(xì)胞熒光(AO/EB)染色和蘇木素染色可以明

4、確HAP為載體clodronate對細(xì)胞凋亡情況。SAP組及不同劑量的SAP+HAP組(50μl，100μl)未見明顯凋亡，SAP+HAP-clodronate(50μl，100μl)作用48h，隨HAP-clodronate濃度增加，其凋亡率增高，差異有顯著性(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:我們成功制備出了空心HAP以及HAP-clodronate，通過透射電鏡發(fā)現(xiàn)其大小均勻。在本實驗中，我們發(fā)現(xiàn)，HAP-clodronate