Emodin對重癥急性胰腺炎SIRS大鼠PMN線粒體凋亡途徑的體外作用.pdf

1、目的：重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)發(fā)病急、進(jìn)展快、并發(fā)癥多，是引起全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)的常見疾病。SIRS是多種疾病發(fā)展至多器官功能障礙綜合征(multiple organs dysfunction syndrome，MODS)的前期表現(xiàn)。一旦MODS發(fā)生，治療十分困難，醫(yī)療費(fèi)用及死亡率都將大大增加。

2、因此，阻斷SIRS向MODS的進(jìn)展是降低SAP病死率的關(guān)鍵。多形核中性粒細(xì)胞(polymorphonuclear neutrophils，PMN)，是炎癥反應(yīng)的重要標(biāo)志，在炎癥的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮關(guān)鍵作用。近期研究認(rèn)為PMN凋亡延遲或障礙進(jìn)而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)持續(xù)發(fā)展和加劇是SIRS的主要病理生理過程。PMN凋亡主要有兩種途徑：一是死亡受體途徑；二是線粒體介導(dǎo)途徑。線粒體被稱為細(xì)胞凋亡的“引發(fā)器”、“放大器”，在中性粒細(xì)胞凋亡中起著十分重

3、要的作用。線粒體細(xì)胞色素C(Cytochrome c，Cyt-c)是一種重要的凋亡蛋白，在細(xì)胞線粒體凋亡途徑中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過制備大鼠重癥急性胰腺炎SIRS模型，從PMN凋亡延遲的角度對SIRS進(jìn)行研究，應(yīng)用大黃素(Emodin)及地塞米松體外干預(yù)，以線粒體Cyt-c作為研究切入點(diǎn)，期望從線粒體凋亡途徑闡明PMN凋亡延遲的分子機(jī)制，尋找Emodin及地塞米松的作用靶點(diǎn)，為臨床治療重癥急性胰腺炎提供理論依據(jù)。

4、
　　 方法：經(jīng)胰膽管逆行注入1.5％脫氧膽酸鈉溶液制備大鼠重癥胰腺炎SIRS模型。動(dòng)物模型制備：20只SD大鼠隨機(jī)分為2組，即：假手術(shù)組(SO組)、重癥急性胰腺炎SIRS組（SIRS組），每組10只。體外干預(yù)實(shí)驗(yàn)：造模24小時(shí)后，將SIRS組和SO組外周血分離的PMN各自分為4組，即：對照組(CON組)、地塞米松干預(yù)組(DEX組)、Emodin干預(yù)組（EMO組）、Emodin聯(lián)合地塞米松干預(yù)組（DAE組）。收集藥物干預(yù)24小時(shí)

5、后的PMN，檢測線粒體跨膜電位變化及線粒體Cyt-c的表達(dá)量。
　　 結(jié)果：
　　 1．線粒體跨膜電位變化
　　 (1)SIRS組：DEX組、EMO組、DAE組線粒體跨膜電位與CON組比較均有不同程度的降低，其中以DEX組降低最明顯（P＜0.01）。EMO組與DAE組比較線粒體跨膜電位降低的程度沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　 (2)SO組：各藥物干預(yù)組與CON組比較線粒體跨膜電位都有不同程度的降低

6、，其中以DEX組降低最明顯(P＜0.01)。EMO組與DAE組比較線粒體跨膜電位降低的程度沒有顯著性差異（P＞0.05）。
　　 (3)相同干預(yù)條件下SIRS組與SO組比較：相同干預(yù)條件下SIRS組線粒體跨膜電位明顯低于SO組(P＜0.01)，而兩組的CON組之間線粒體跨膜電位沒有顯著性差異（P＞0.05）。
　　 2．線粒體Cyt-c的表達(dá)量
　　 (1)SIRS組：各組中均有Cyt-c表達(dá)，其中以DEX組表達(dá)

7、量最高而CON組最低。各藥物干預(yù)組與CON組比較線粒體Cyt-c的表達(dá)量均明顯升高（P＜0.01）。EMO組與DAE組比較線粒體Cyt-c的表達(dá)量沒有顯著性差異（P＞0.05）。
　　 (2)SO組：各組中線粒體Cyt-c的表達(dá)均為陰性。
　　 結(jié)論：
　　 1．Emodin、地塞米松體外干預(yù)，均可以促進(jìn)重癥急性胰腺炎SIRS大鼠PMN線粒體跨膜電位降低。
　　 2．Emodin、地塞米松體外干預(yù)，均可以