耐熱的β-半乳糖苷酶產(chǎn)生菌株EW-220的分離、鑒定及發(fā)酵產(chǎn)物性質(zhì)的初步研究.pdf

1、對本實驗對采自西藏拉孜縣錫欽鄉(xiāng)堆肥及溫泉、西藏羊八井溫泉、西藏八宿吉達(dá)溫泉樣，西藏布江達(dá)民比村牛糞土及西藏德欽牛圈共14份土樣進(jìn)行細(xì)菌分離，共得到220株能在55℃生長的菌株，進(jìn)行初篩后，得到41株能使篩選培養(yǎng)基變藍(lán)的菌株，進(jìn)行復(fù)篩得到23株確定有β-半乳糖苷酶酶活的菌株，測定酶活。其中220號菌株酶活最高，命名為EW-220為本實驗的出發(fā)菌株?！　【闑W-220革蘭氏染色反應(yīng)為陽性，菌體為呈直桿狀。菌株EW-220發(fā)酵產(chǎn)生的耐高溫

2、的β-半乳糖苷酶最適反應(yīng)的溫度為60℃，最適反應(yīng)pH值為6.5。粗酶液在50℃水浴中保溫48h，酶活沒有改變；55℃保溫18h，酶活損失一半。在pH5.5～8.0范圍內(nèi)高溫乳糖酶活性穩(wěn)定。較強的耐熱性有利于進(jìn)行固定化?！　≡摼甏置敢涸?5℃水解條件下，水解牛乳中乳糖水解率幾乎呈直線上升，添加量為1U/mL時2.5h可達(dá)到50％的水解率，乳糖水解率達(dá)到66％趨于平緩；而添加量為2U/mL時2h可達(dá)到55％的水解率，3h能達(dá)到80％的水