鼠尾藻和海帶多糖與多酚對黃嘌呤氧化酶抑制作用及對高尿酸血癥小鼠降尿酸效果研究.pdf

1、黃嘌呤氧化酶(EC1.1.3.2.2，Xathine Oxidase，XOD)是機體尿酸代謝的關(guān)鍵酶，在機體內(nèi)能夠?qū)⒋吸S嘌呤氧化為黃嘌呤并且繼續(xù)氧化生成終產(chǎn)物尿酸、過氧化氫和超氧化物。人體內(nèi)尿酸含量過高會引發(fā)高尿酸血癥并最終導(dǎo)致痛風(fēng)，持續(xù)性的高尿酸血癥會引起高血壓、高血脂、心血管疾病、慢性腎病等并發(fā)癥的發(fā)生。近年來，黃嘌呤氧化酶抑制劑作為一種極為有效的抗高尿酸血癥藥物受到了國內(nèi)外研究學(xué)者的廣泛關(guān)注。但是，目前臨床中應(yīng)用的黃嘌呤氧化酶抑制

2、劑類藥物普遍存在著嚴重的毒副作用，因此，從天然活性物質(zhì)中尋找高效、安全無毒的黃嘌呤氧化酶抑制劑逐漸成為抗高尿酸血癥藥物研究的新方向。
　　本文研究了鼠尾藻和海帶多糖與多酚對XOD的抑制作用，測定了它們在體外對XOD的半抑制濃度(IC50);動力學(xué)方法研究了這些多糖與多酚對XOD的抑制類型、抑制機理和抑制常數(shù);分別測定了它們與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用以及在體外對自曲基的清除作用;采用氧嗪酸鉀腹腔注射小鼠建立高尿酸血癥模型，研究了海帶多

3、糖對高尿酸血癥小鼠的降尿酸效果，并對小鼠肝臟中XOD的活力進行測定。實驗結(jié)果如下:
　　實驗測得鼠尾藻多酚與鼠尾藻多糖對XOD都具有一定的抑制作用，其IC50分別為0.58mg/mL和1.21mg/mL，動力學(xué)分析結(jié)果顯示，二者對XOD的抑制類型都為競爭性可逆抑制作用，Ki值分別為0.07mg/mL和0.46mg/mL;海帶多酚與海帶多糖的IC50分別為0.88mg/mL和1.63mg/mL，海帶多糖對XOD的抑制類型為競爭性可逆

4、抑制作用，Ki值為0.30mg/mL，海帶多酚對XOD的抑制類型為反競爭性可逆抑制作用，Ki值為0.21 mg/mL。用等毒法研究這些海藻多糖和多酚與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用，結(jié)果顯示鼠尾藻多酚與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用屬于弱協(xié)同作用;鼠尾藻多糖、海帶多酚、海帶多糖與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用都表現(xiàn)為協(xié)同作用。
　　鼠尾藻和海帶多糖與多酚在體外對OH-和O2-都具有清除作用，其中鼠尾藻多糖和鼠尾藻多酚對OH-的清除率都大于50％，并且隨著

5、清除劑濃度的增大，清除率也隨之升高，二者對O2-的清除作用較弱，最高清除率為61.86％，劑量依賴關(guān)系不顯著。海帶多糖和海帶多酚對OH-的清除作用更強，清除率最高可達到92.13％，劑量依賴效應(yīng)顯著，而對O2-的清除作用較弱，劑量依賴效應(yīng)不顯著。
　　用不同劑量的海帶多糖灌胃7d后，海帶多糖高、中劑量組小鼠血尿酸水平明顯低于模型組(P＜0.05)，小鼠肝臟中XOD的酶活力與模型組相比差異顯著(P＜0.05)，說明海帶多糖能夠顯著降

6、低高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平，且對小鼠肝臟中XOD酶活具有抑制作用。實驗組小鼠的血尿酸水平與正常組小鼠相比無明顯差別(P＞0.05)，說明高尿酸血癥小鼠的血尿酸已基本恢復(fù)至正常水平。此外，海帶多糖組小鼠在實驗期間體重增長穩(wěn)定、毛色鮮亮、精神狀態(tài)良好、無死亡現(xiàn)象，證明海帶多糖作為降尿酸藥物是安全無毒的。
　　鼠尾藻和海帶多糖與多酚對XOD具有較高的抑制活性，在體外對羥自由基和過氧陰離子都具有較強的清除作用，且海帶多糖對氧嗪酸鉀所致的