孔石莼和真江蘺提取物對黃嘌呤氧化酶抑制作用及對高尿酸血癥小鼠降尿酸效果研究.pdf

1、黃嘌呤氧化酶(EC:1.2.3.2)是人體內(nèi)核酸分解的關(guān)鍵酶,它催化黃嘌呤和次黃嘌呤生成尿酸,同時釋放超氧根陰離子和過氧化物。人體內(nèi)尿酸水平過高會引發(fā)高尿酸血癥并導(dǎo)致痛風(fēng),而過氧化物在人體內(nèi)積累會引發(fā)腫瘤、衰老和心血管疾病。因此,近年來對黃嘌呤氧化酶抑制劑的研究受到人們廣泛關(guān)注。但是,目前臨床應(yīng)用的黃嘌呤氧化酶抑制藥物存在嚴重的副作用,因此,從天然藻類中尋找具有高效抑制活性的黃嘌呤氧化酶抑制劑成為新的研究方向。
　　本文通過正交試

2、驗和單因素實驗確定了孔石莼和真江蘺乙醇提取物的最佳浸提條件;測定了孔石莼和真江蘺乙酸乙酯組分和水相組分對黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxdase,XO)的半抑制濃度;動力學(xué)分析測定了孔石莼和真江蘺水相組分的抑制機理、抑制類型和抑制常數(shù);分別測定了兩種藻類的水相組分與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用;實驗測定了兩種藻類水相組分對自由基的清除作用,并分析了提取物中可能存在的有效化學(xué)成分;用氧嗪酸鉀鹽腹腔注射小鼠建立高尿酸血癥模型,并測定了真江蘺水

3、相組分對高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響。具體研究內(nèi)容和實驗結(jié)果如下:
　　實驗用正交試驗法優(yōu)化了兩種藻類乙醇提取物的浸提條件:真江蘺的最佳浸提條件為:浸提時間3h,浸提溫度55℃,乙醇濃度70％,料液比1:16?？资蛔罴呀釛l件為:浸提時間4.5h,浸提溫度65℃,乙醇濃度90%,料液比1:8。
　　實驗用乙酸乙酯分別萃取兩種藻類乙醇提取物得到乙酸乙酯組分和水相組分,測得兩種藻類水相組分具有較高的抑制活性,其 IC50分別

4、為0.58mg/mL和0.32mg/mL,乙酸乙酯組分對XO的IC50分別為7.74mg/mL和0.72mg/mL。實驗對水相組分進行動力學(xué)研究,測得孔石莼水相組分對XO抑制類型為反競爭性可逆抑制,KIS為0.40;真江蘺水相組分對XO抑制類型為競爭性可逆抑制,KI為0.84;
　　用共毒系數(shù)法測定了兩種藻類水相組分和別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用?？资凰嘟M分和別嘌呤醇的共毒系數(shù)為16.2,屬于弱協(xié)同作用。真江蘺水相組分和別嘌呤醇的共

5、毒系數(shù)為?14.6,屬于弱拮抗作用。
　　兩種藻類的水相組分對·OH和O?2的清除作用,結(jié)果顯示,兩種藻類都對·OH有良好的清除作用,對O?2無清除作用。實驗還對兩種藻類水相組分的化學(xué)成分進行了研究,發(fā)現(xiàn)兩種藻類水相組分中都含有糖和苷類、多肽和蛋白質(zhì)類以及生物堿類成分。
　　實驗采用氧嗪酸鉀鹽建立小鼠高尿酸模型,測定了真江蘺水相組分對高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響,結(jié)果顯示,真江蘺高劑量組可顯著降低小鼠體內(nèi)尿酸水平(P<0.