孔石莼和真江蘺提取物對(duì)黃嘌呤氧化酶抑制作用及對(duì)高尿酸血癥小鼠降尿酸效果研究.pdf

1、黃嘌呤氧化酶(EC:1.2.3.2)是人體內(nèi)核酸分解的關(guān)鍵酶,它催化黃嘌呤和次黃嘌呤生成尿酸,同時(shí)釋放超氧根陰離子和過(guò)氧化物。人體內(nèi)尿酸水平過(guò)高會(huì)引發(fā)高尿酸血癥并導(dǎo)致痛風(fēng),而過(guò)氧化物在人體內(nèi)積累會(huì)引發(fā)腫瘤、衰老和心血管疾病。因此,近年來(lái)對(duì)黃嘌呤氧化酶抑制劑的研究受到人們廣泛關(guān)注。但是,目前臨床應(yīng)用的黃嘌呤氧化酶抑制藥物存在嚴(yán)重的副作用,因此,從天然藻類(lèi)中尋找具有高效抑制活性的黃嘌呤氧化酶抑制劑成為新的研究方向。
　　本文通過(guò)正交試

2、驗(yàn)和單因素實(shí)驗(yàn)確定了孔石莼和真江蘺乙醇提取物的最佳浸提條件;測(cè)定了孔石莼和真江蘺乙酸乙酯組分和水相組分對(duì)黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxdase,XO)的半抑制濃度;動(dòng)力學(xué)分析測(cè)定了孔石莼和真江蘺水相組分的抑制機(jī)理、抑制類(lèi)型和抑制常數(shù);分別測(cè)定了兩種藻類(lèi)的水相組分與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用;實(shí)驗(yàn)測(cè)定了兩種藻類(lèi)水相組分對(duì)自由基的清除作用,并分析了提取物中可能存在的有效化學(xué)成分;用氧嗪酸鉀鹽腹腔注射小鼠建立高尿酸血癥模型,并測(cè)定了真江蘺水

3、相組分對(duì)高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響。具體研究?jī)?nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　實(shí)驗(yàn)用正交試驗(yàn)法優(yōu)化了兩種藻類(lèi)乙醇提取物的浸提條件:真江蘺的最佳浸提條件為:浸提時(shí)間3h,浸提溫度55℃,乙醇濃度70％,料液比1:16?？资蛔罴呀釛l件為:浸提時(shí)間4.5h,浸提溫度65℃,乙醇濃度90%,料液比1:8。
　　實(shí)驗(yàn)用乙酸乙酯分別萃取兩種藻類(lèi)乙醇提取物得到乙酸乙酯組分和水相組分,測(cè)得兩種藻類(lèi)水相組分具有較高的抑制活性,其 IC50分別

4、為0.58mg/mL和0.32mg/mL,乙酸乙酯組分對(duì)XO的IC50分別為7.74mg/mL和0.72mg/mL。實(shí)驗(yàn)對(duì)水相組分進(jìn)行動(dòng)力學(xué)研究,測(cè)得孔石莼水相組分對(duì)XO抑制類(lèi)型為反競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制,KIS為0.40;真江蘺水相組分對(duì)XO抑制類(lèi)型為競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制,KI為0.84;
　　用共毒系數(shù)法測(cè)定了兩種藻類(lèi)水相組分和別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用?？资凰嘟M分和別嘌呤醇的共毒系數(shù)為16.2,屬于弱協(xié)同作用。真江蘺水相組分和別嘌呤醇的共

5、毒系數(shù)為?14.6,屬于弱拮抗作用。
　　兩種藻類(lèi)的水相組分對(duì)·OH和O?2的清除作用,結(jié)果顯示,兩種藻類(lèi)都對(duì)·OH有良好的清除作用,對(duì)O?2無(wú)清除作用。實(shí)驗(yàn)還對(duì)兩種藻類(lèi)水相組分的化學(xué)成分進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)兩種藻類(lèi)水相組分中都含有糖和苷類(lèi)、多肽和蛋白質(zhì)類(lèi)以及生物堿類(lèi)成分。
　　實(shí)驗(yàn)采用氧嗪酸鉀鹽建立小鼠高尿酸模型,測(cè)定了真江蘺水相組分對(duì)高尿酸血癥小鼠血尿酸水平的影響,結(jié)果顯示,真江蘺高劑量組可顯著降低小鼠體內(nèi)尿酸水平(P<0.