丙泊酚對脂多糖誘導的小鼠腎小球系膜細胞的影響.pdf

1、目的：本文旨在通過用脂多糖刺激小鼠腎小球系膜細胞來研究丙泊酚對脂多糖刺激的腎小球系膜細胞的增殖、凋亡及分泌NO的影響。
　　方法：實驗采用的是小鼠腎小球系膜細胞（SV40MES13），當細胞培養(yǎng)至3-5代時，常規(guī)消化收集細胞，調整細胞濃度，均勻種植在兩塊48孔板和一塊96孔板上。將細胞分為8組，即空白對照組、丙泊酚組（5,10,20μg/ml)、脂多糖組（10μg/ml）和脂多糖（10μg/ml）+丙泊酚（5,10,20μg/ml

2、）組，每組各設6個復孔。按照以上分組向各個孔內添加不同藥物刺激，脂多糖（10μg/ml）+丙泊酚（5,10,20μg/ml）組需在添加脂多糖1小時后再加入不同劑量的丙泊酚。最后將細胞放入CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48小時。在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況并照相，并通過MTT法檢測細胞的增殖程度；收集各孔細胞培養(yǎng)基用于ELISA法檢測細胞分泌NO的情況，并消化收集各孔細胞，采用流式細胞儀進行檢測分析細胞的凋亡情況。
　　結果：1倒置顯微鏡下

3、觀察，脂多糖組細胞數(shù)量明顯多于空白對照組與單純丙泊酚組，且細胞均由不規(guī)則形變成圓形；脂多糖+丙泊酚（10,20μg/ml）組細胞數(shù)量較脂多糖組明顯減少，并有部分細胞出現(xiàn)空泡或懸浮，而脂多糖+丙泊酚5μg/ml組細胞較脂多糖組變化不明顯。2與空白對照組相比，單純丙泊酚（5,10,20μg/ml）組細胞的增殖程度、凋亡率和NO分泌情況均沒有明顯變化（P>0.05）,脂多糖組細胞的增殖程度及NO的分泌均顯著升高,而凋亡率降低（P<0.05）；

4、在脂多糖處理后再加入中、高濃度丙泊酚（10,20μg/ml）均可導致細胞的增殖程度減弱, NO的分泌減少,細胞凋亡率有所增加,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,并且差異在脂多糖+丙泊酚20μg/ml組中更明顯，而在脂多糖處理后再加入低濃度（5μg/ml）的丙泊酚則沒有明顯變化（P>0.05）。
　　結論：1低、中、高濃度的丙泊酚（5,10,20μg/ml）對正常小鼠腎小球系膜細胞的增殖、凋亡及NO的分泌均沒有明顯影響。2中、高濃度