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1、目的:探討紅霉素對(duì)香煙煙霧提取物(CSE)刺激的人巨噬細(xì)胞株U-937產(chǎn)生活性氧(ROS)及氧化物4-羥基壬烯醛(4-HNE)的影響。
方法:巨噬細(xì)胞株U-937細(xì)胞體外培養(yǎng),通過(guò)四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法觀察CSE及紅霉素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。將傳代的細(xì)胞分24,48,72h3個(gè)時(shí)間段,每個(gè)時(shí)間段再分對(duì)照組,CSE組,紅霉素+CSE組。以2,7-二氯熒光乙酰乙酸鹽(2,7-dichloro fluorescein diace
2、tate,DCFH-DA)為細(xì)胞內(nèi)活性氧探針,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞產(chǎn)生ROS的量;應(yīng)用Western印跡法測(cè)蛋白4-HNE的表達(dá)。
結(jié)果:CSE0.1%和1%組在各時(shí)間段均明顯增加細(xì)胞ROS的釋放(P<0.01),紅霉素(1ug/ml)預(yù)孵育24,48,72h能抑制0.1%CSE對(duì)細(xì)胞ROS的上調(diào)作用(p<0.05,p<0.01),紅霉素(1ug/ml)預(yù)孵育48,72h能抑制1%CSE對(duì)細(xì)胞ROS的上調(diào)作用(p<0.0
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