氧化應(yīng)激誘導(dǎo)自噬對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察氧化應(yīng)激是否可誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞（MSC）自噬，探索在氧化應(yīng)激微環(huán)境中自噬對MSC增殖和凋亡的影響及可能機制，以期提高移植MSC治療糖尿病勃起功能障礙（DMED）的效果。
　　方法：以過氧化氫（H2O2）模擬氧化應(yīng)激微環(huán)境。臺盼蘭染色細胞計數(shù)法及四甲基偶氮唑藍（MTT）檢測不同H2O2濃度（0、50、100、200、400μmol/L）對 MSC增殖的影響。聯(lián)合 MTT、流式細胞術(shù)、Western blot及透射電鏡研

2、究H2O2對MSC凋亡及自噬的影響。
　　結(jié)果：H2O2明顯抑制MSC增殖，呈濃度依耐性，IC50=（384.5751±16.8895）μmol/L；Western Blot及透射電鏡提示H2O2在誘導(dǎo)MSC凋亡的同時，誘導(dǎo)MSC產(chǎn)生自噬；MTT及流式細胞術(shù)提示H2O2組細胞增殖受抑、凋亡率上升，阻斷自噬后細胞增殖進一步減弱，凋亡率進一步上升；Western blot結(jié)果提示H2O2誘導(dǎo)cleaved-caspase3增多及多聚

3、ADP-核糖聚合酶1（ PARP1）裂解增強，阻斷凋亡后cleaved-caspase3降低及PARP1裂解減弱，阻斷自噬后cleaved-caspase3進一步增多及PARP1裂解進一步增強。
　　結(jié)論：氧化應(yīng)激對MSC存活具有雙重作用，在誘導(dǎo)MSC凋亡的
　　同時還誘導(dǎo)保護性自噬，阻斷MSC自噬可以增加MSC的凋亡，因此進一步增強細胞保護性自噬將有望提高移植MSC在糖尿病高氧化應(yīng)激微環(huán)境存活率，從而改善移植MSC對糖尿病