稻瘟病菌致病缺陷突變體KD-560的獲得及標(biāo)記基因MoCYP537A3al功能的初步研究.pdf

1、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是水稻上的重要病害。了解M.oryzae的致病分子機(jī)理不僅對防治稻瘟病具有重要的意義，而且它作為一個(gè)理想的研究體系對了解其他植物病原真菌與寄主的相互作用也有重要的意義。分離和鑒定稻瘟病菌的致病相關(guān)基因，是達(dá)到這一目標(biāo)的關(guān)鍵所在。DNA插入突變是標(biāo)記、分離功能基因的有效途徑之一，ATMT是絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化的一個(gè)的新的技術(shù)，具有轉(zhuǎn)化效率高、成本低，操作方便和重復(fù)性好多重優(yōu)點(diǎn)。

2、>　　 利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法(ATMT)篩選出1024個(gè)轉(zhuǎn)化子，用大麥葉片離體接種的方法快速測定部分稻瘟病菌轉(zhuǎn)化子的致病性。KD-560在CM培養(yǎng)基上菌落生長速率較慢，菌落顏色較野生型淺，菌絲致密，產(chǎn)孢量明顯下降。在無傷口接種情況下，該突變體不能侵入大麥及水稻葉片，說明KD-560突變體在寄主組織中擴(kuò)展進(jìn)程被阻斷。采用hiTAIL-PCR的方法擴(kuò)增了T-DNA右邊界的760bp基因組DNA序列，并克隆到pGEM-Teasy載體上。測序