PcG蛋白HPC2的生物信息學分析及其在不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細胞中的表達研究.pdf

1、目的:宮頸癌是全球女性惡性腫瘤中的常見疾病，嚴重威脅著女性的生命健康。作為發(fā)展中國家的中國每年的新發(fā)病例占世界總新發(fā)病例的30％左右，且宮頸癌患者以每年2％-3％的速度增長。近年來多個宮頸癌普查顯示發(fā)病年齡趨于年輕化?，F已有大量的研究表明HPV感染特別是高危型HPV病毒的感染是絕大多數宮頸癌癌前病變和宮頸癌的主要原因。而HPV16與HPV18在致宮頸癌的高危型HPV中最常見。多梳基因(Polycomb group，PcG)是近年來新發(fā)現

2、的一個腫瘤相關基因。其已被證實為發(fā)育時維持同源異形基因穩(wěn)定表現的重要因子，在胚胎發(fā)育、腫瘤發(fā)生和轉移以及干細胞的維持中有著重要的作用?，F已有多項研究表明PcG是一種腫瘤相關基因，參與鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等多種人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。HPC2屬于PcG基因家族成員，在多種癌組織中有大量表達。研究證實PcG蛋白HPC2在誘導癌細胞凋亡、調控細胞生長等方面的作用，并有研究表明HPC2在宮頸癌中的表達較正常宮頸組織明顯增高，但其在宮頸癌組

3、織中的表達及作用途徑仍不明晰，需要進一步研究證實。因此深入了解與深入研究PcG蛋白HPC2的生物信息學功能及其與宮頸癌的關系很有必要，希望能為宮頸癌的發(fā)病機制的研究提供新的方向。本實驗先通過生物信息學方法，對HPC2蛋白的氨基酸序列進行理化性質分析、親/疏水性分析、細胞內的定位情況、結構域分析，并對其進行系統(tǒng)演化關系預測，為日后開展HPC2的相關研究提供理論依據。后通過體外培養(yǎng)不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細胞Siha(HPV16感染)，H

4、eLa(HPV18感染)，C-33a（無HPV感染），探討PcG蛋白HPC2在3種宮頸癌細胞中的表達情況，并比較PcG蛋白HPC2在不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細胞中的表達是否存在差異，旨在為HPV致宮頸癌的作用機制提供一個新的研究方向。
　　方法:1.體外培養(yǎng)三種宮頸癌細胞株;2.采用熒光定量RT-PCR，觀察不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細胞中HPC2基因的表達情況。比較Siha，HeLa，C-33a細胞中HPC2的表達有無差異;3

5、.采用western blot技術，比較Siha，Hela，C-33a宮頸癌細胞中PcG蛋白HPC2的表達是否存在差異。
　　結果:1.熒光定量RT-PCR結果顯示:不同HPV感染狀態(tài)下的宮頸癌細胞均有HPC2基因的表達。Hela、Siha細胞中的HPC2基因的表達較C-33a細胞明顯下調，P值均小于0.05，有統(tǒng)計學意義。Hela與Siha細胞間HPC2基因的表達無明顯差異，P=0.318＞0.05。2.Western Blot