非酒精性肝臟脂肪變性相關(guān)危險(xiǎn)因素及與SIRT1,GCKR基因單核苷酸多態(tài)性的相關(guān)性研究.pdf

1、流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示：非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)患病率逐年增加，并呈現(xiàn)低齡化發(fā)病趨勢，已成為新的、主要的公共健康問題。NAFLD與肥胖、2型糖尿病等代謝組分(MS)密切相關(guān)，隨著肥胖、2型糖尿病、高脂血癥、高血壓等疾病發(fā)生率的增加，使得很大比例的人群面臨著發(fā)生NAFLD的風(fēng)險(xiǎn)，因此，探索NAFLD的相關(guān)危險(xiǎn)因?yàn)轱@得尤為關(guān)鍵。家族及種族患病差異的研究發(fā)現(xiàn)，某些基因的

2、單核苷酸多態(tài)性可能與NAFLD發(fā)病易感性相關(guān)。目前，有關(guān)沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silent information regulator1，SIRT1)與葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(glucokinase regulatory protein，GCKR)基因多態(tài)性的研究主要集中在肥胖，糖尿病和心血管病等疾病，還未有研究直接證實(shí)上述基因的多態(tài)性與NAFLD的相關(guān)性。影響脂肪肝的相關(guān)因素復(fù)雜，探究非酒精性脂肪肝的相關(guān)危險(xiǎn)因素及與GCKR、SIRTl基因

3、多態(tài)性關(guān)系研究，對NAFLD的早期診斷和防治具有十分重要的臨床意義。
　　目的:探討非酒精性脂肪肝相關(guān)危險(xiǎn)因素，特別是GCKR rs3817588、rs780094位點(diǎn)和SIRT1 rs12778366位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與NAFLD發(fā)病易感性的關(guān)系，為NAFLD的早期發(fā)現(xiàn)和防治提供數(shù)據(jù)支持。
　　方法:
　　1.由醫(yī)師詳細(xì)詢問研究對象的一般狀況、既往病史，測量腰圍、臀圍，并行腹部B超檢查。所有受試者禁食12h后，空腹采

4、靜脈血樣，由醫(yī)院體檢中心統(tǒng)一測定測定總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesferol，HDL)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL- C)、空腹血糖(Fasting plasma glucose，F(xiàn)PG)、尿酸(Uric acid，UA)及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine aminotransferase

5、，ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate aminotransferase，AST)等肝炎標(biāo)志物指標(biāo)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，符合正態(tài)分布，采用t檢驗(yàn)、偏態(tài)分布采用秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率(％)表示，采用χ2檢驗(yàn)，多因素分析采用Logistic回歸模型，通過計(jì)算相對危險(xiǎn)度(RR)進(jìn)行危險(xiǎn)因素關(guān)聯(lián)分析。分析兩組間的臨床生化指標(biāo)和一般特征，探討非酒精性脂肪肝相關(guān)危險(xiǎn)因素。
　　2.通過5785例的大樣本人群橫斷

6、面研究，選取患病率相近的區(qū)進(jìn)行采樣，調(diào)查對象采集其病史，采集空腹靜脈血用于測量血糖、血脂相關(guān)生化指標(biāo)及雌激素與雄激素水平，以及全血中提取DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、Sequenom公司MassARRAY時(shí)間飛行質(zhì)譜技術(shù)分析GCKR rs3817588、rs780094位點(diǎn)和SIRT1 rs12778366位點(diǎn)基因型。通過Hardy-weinbeurg遺傳平衡定律分析兩組各基因型群體代表性。以非條件Logistic回歸分析基因變異

7、及NAFLD之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.橫斷面調(diào)查人群，根據(jù)B超檢查診斷分為正常對照組(4086例)和NAFLD病例組(1699例)，其中，NAFLD組BMI、ALT、AST、TC、TG、FPG、UA、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)均顯著升高，而HDL-C顯著降低(P<0.05)，年齡與性別無明顯差異(P>0.05)，但60歲前后，男性和女性在兩年齡組的患病率有較大差異，隨著年齡的增加，男性的發(fā)病危險(xiǎn)降低，女性的發(fā)

8、病危險(xiǎn)升高。Logistic回歸分析顯示BMI1(OR為4.30)、TG(OR為1.95)、既往病史患有高血壓和糖尿病(既往病史3，OR為1.92)、FPG(OR為1.80)、舒張壓(OR為1.02)、LDL-C(OR為1.27)、ALT(OR為1.02)、AST/ALT(OR為0.40)是NAFLD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，HDL-C(OR為0.62)為保護(hù)因素(P<0.05)。
　　2.小樣本調(diào)查人群，根據(jù)B超結(jié)果，篩選納入NAFLD組

9、132例和對照組252例，其中，男性雄激素和女性雌激素在對照組和病例組的水平有較大差異，男性的雄激素在病例組為3.75±1.08，對照組為4.44±1.04；女性雌激素在病例組為12.46±6.03，對照組為10.68±5.71。隨著雄激素的升高，男性的發(fā)病危險(xiǎn)隨之降低(OR0.50，0.32~0.76)，雌激素的升高使女性的發(fā)病危險(xiǎn)升高(OR1.05，1.07~1.102)。
　　3. NAFLD組與正常對照組GCKR rs38

10、17588基因型頻率分布無顯著差異(P>0.05)，但其等位基因頻率分布存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。等位基因C攜帶者尿酸水平明顯降低，突變基因C作為保護(hù)因素，使發(fā)生NAFLD的風(fēng)險(xiǎn)度降到OR=0.703(95%CI為0.50～0.98)。GCKR rs780094和SIRT1 rs12778366位點(diǎn)的基因型頻率和等位基因頻率分布在兩組無差異(P>0.05)。各基因型間也未發(fā)現(xiàn)生化指標(biāo)和一般指標(biāo)的變化。經(jīng)校正年齡、性別后OR值無明顯

11、變化。
　　結(jié)論:
　　1. NAFLD患者具有肥胖、糖脂代謝紊亂(高FPG、高TG、高LDL-C、低 HDL-C)、高血壓、高尿酸的特征，且肝酶升高。高血壓和糖尿病的既往病史、BMI、FPG、TG、LDL-C、DBP、ALT是NAFLD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，HDL-C為保護(hù)因素。
　　2.男性雄激素和女性雌激素在對照組和病例組的水平有較大差異，隨著雄激素水平的升高，男性的發(fā)病危險(xiǎn)隨之降低，雌激素水平的升高使女性的發(fā)病危險(xiǎn)升