艾灸預(yù)刺激對(duì)AD大鼠海馬14-3-3蛋白及神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的
　　 通過(guò)觀察艾灸預(yù)刺激對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和海馬區(qū)14-3-3蛋白的表達(dá)以及神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率的影響,探討艾灸預(yù)刺激改善AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力以及抗神經(jīng)元細(xì)胞凋亡作用的機(jī)制.深入探究艾灸在“治未病”理論指導(dǎo)下對(duì)AD防治作用的機(jī)理,并為艾灸在臨床AD防治工作中的應(yīng)用提供理論支撐。
　　 方法
　　 將SD大鼠70只通過(guò)Y型迷宮篩選后(即淘汰反應(yīng)過(guò)于敏捷和過(guò)于遲鈍的大鼠)隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組

2、、模灸組(即先造模后灸治)和艾灸預(yù)刺激組(以下簡(jiǎn)稱預(yù)灸組)。選取百會(huì)和雙側(cè)腎俞穴施艾條溫和灸.預(yù)灸組施行艾灸8療程后造模,造模采取海馬CA1區(qū)一次性注射寡聚Aβ1-42的方法.造模成功后(施行手術(shù)后第4天起)繼續(xù)艾灸治療11天,模灸組僅在造模成功后與預(yù)灸組同時(shí)進(jìn)行灸治11天。造模成功后第14天開(kāi)始進(jìn)行Morris水迷宮空間探索和定位導(dǎo)航實(shí)驗(yàn),共歷時(shí)5天,實(shí)驗(yàn)完畢后取材。免疫印跡法檢測(cè)大鼠海馬14-3-3蛋白含量,流式細(xì)胞儀檢測(cè)大鼠海馬神

3、經(jīng)元細(xì)胞凋亡率.統(tǒng)計(jì)分析各組差異。
　　 結(jié)果
　　 1.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn):正常組與假手術(shù)組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯差異(p＞0.05)。定位導(dǎo)航實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)均顯示,模型組與假手術(shù)組比較,結(jié)果有極顯著差異(p＜0.01);與模型組比較,預(yù)灸組、模灸組結(jié)果優(yōu)于模型組(p＜0.01)且預(yù)灸組較模灸組更佳(p＜0.05)。
　　 2.14-3-3蛋白免疫印跡結(jié)果表明:模型組大鼠海馬內(nèi)14-3-3蛋白水平明顯升高

4、(p＜0.01),而不論艾灸治療還是提前實(shí)施艾灸預(yù)防都可促進(jìn)14-3-3蛋白的表達(dá)(p＜0.05),艾灸預(yù)刺激與僅艾灸治療比表達(dá)量更高(p＜0.05)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)海馬神經(jīng)元凋亡數(shù)提示,Aβ注射造模后神經(jīng)元凋亡率明顯上升,通過(guò)艾灸可降低其凋亡率且預(yù)刺激效果更明顯(p＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1.根據(jù)AD腎虛髓空、神機(jī)失用的病機(jī)特點(diǎn),應(yīng)以益腎填髓,健腦益智為治則,可選擇百會(huì)和腎俞作為艾灸防.治該病的主穴。

5、　　 2.艾灸預(yù)刺激和艾灸治療均能有效改善AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能,減輕AD患者認(rèn)知功能退化等癥狀,從而延緩衰老。其中采取艾灸預(yù)防措施對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的改善作用更咖明顯。
　　 3.艾灸預(yù)刺激和艾灸治療均能明顯降低Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡,增加14-3-3蛋白的表達(dá),發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)。兩者相比,以艾灸預(yù)刺激效果更為顯著。
　　 4.艾灸防治AD的作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,增加14-3-3蛋白的表達(dá)