14-3-3蛋白對神經(jīng)細胞分化的影響.pdf

1、為了研究14-3-3ε、γ在神經(jīng)細胞分化中的作用,我們用pEGFP-14-3-3ε、γ轉(zhuǎn)染PC12細胞,并以pEGFP空載體為對照.結(jié)果發(fā)現(xiàn),過表達pEGFP-14-3-3ε、γ的PC12細胞發(fā)生了明顯的分化,有神經(jīng)突起的生長.此外,我們將pEGFP、pEGFP-14-3-3ε在培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)干細胞中過表達,結(jié)果發(fā)現(xiàn),過表達pEGFP的神經(jīng)干細胞仍然保持緊密成團的狀態(tài),形成神經(jīng)干細胞球,形態(tài)沒有發(fā)生變化,而過表達pGFP-14-3-3ε

2、的神經(jīng)干細胞形態(tài)發(fā)生了顯著的分化,不僅細胞遷移,而且有明顯的神經(jīng)突起的生長.結(jié)果說明,14-3-3ε、γ能夠促進神經(jīng)細胞的分化.然而,當我們以pEGFP空載體為對照,將pEGFP-14-3-3 η在PC12細胞中過表達時,發(fā)現(xiàn)過表達pEGFP-14-3-3 η的PC12細胞形態(tài)沒有發(fā)生明顯的分化.而用NGF處理PC12細胞后,過表達pEGFP-14-3-3 η的PC12細胞形態(tài)仍舊沒有發(fā)生明顯的分化,過表達pGFP的PC12細胞發(fā)生了分

3、化.結(jié)果說明,14-3-3 η的過表達抑制PC12細胞的分化.我們進一步研究了14-3-3蛋白家族成員ε、γ、τ和η四成員與Math2的相互作用對Math2介導的GAP-43啟動子轉(zhuǎn)錄激活作用的影響.熒光素酶報告基因檢測結(jié)果表明,14-3-3ε、γ、τ分別與Math2共轉(zhuǎn)染P19細胞,它們與Math2的相互作用都進一步增強了Math2介導的GAP-43啟動子的轉(zhuǎn)錄激活作用.而14-3-3 η對Math2介導的GAP-43基因啟動子的轉(zhuǎn)錄