全外顯子組測(cè)序技術(shù)鑒定1個(gè)Olmsted綜合征家系的致病基因和4個(gè)表皮松解性掌跖角化癥家系的KRT9基因突變譜分析及產(chǎn)前DNA診斷.pdf

1、背景:(1)Olmsted綜合征（Olmsted syndrome OMIM:＃614594）是一種罕見的以殘毀性掌趾角化和腔口周圍角化斑兩個(gè)特征性皮損為主要臨床特征的先天性皮膚病。其他臨床表現(xiàn)還包括彌漫性脫發(fā)、甲營(yíng)養(yǎng)不良、口腔黏膜白斑、指跖的縮窄等。已發(fā)現(xiàn)的Olmsted綜合征致病基因包括TRP V3、MBTPS2等。(2)表皮松解性掌跖角化癥（epidermolytic palmoplantar keratoderma，EPPK O

2、MIM:#144200）為一種較為常見的常染色體顯性遺傳性皮膚病，臨床表現(xiàn)為掌跖皮膚呈彌漫性的角質(zhì)增厚，主要由KRT9、KRT1等基因的突變?cè)斐伞?br>　　目的:(1)用全外顯子組測(cè)序技術(shù)(whole exome sequencing，WES)尋找一個(gè)疑似Olmsted綜合征家系的致病基因突變，為家系的臨床確診和可能的發(fā)病分子機(jī)制提供資料，并為該家系的后續(xù)產(chǎn)前DNA診斷、植入前遺傳學(xué)診斷(preimplantation genetic

3、 diagnosis，PGD)等奠定基礎(chǔ)。(2)繪制4個(gè)EPPK家系的致病基因突變譜。在明確致病基因突變后，應(yīng)其中3個(gè)家系的請(qǐng)求，實(shí)施相關(guān)的產(chǎn)前DNA診斷。
　　方法:(1)收集了1個(gè)居于成都市的疑似Olmsted綜合征家系（包括9例成員）的臨床資料及外周抗凝血血樣，用PCR-Sanger測(cè)序方法對(duì)先證者等進(jìn)行KRT9和KRT1等基因突變分析，但并未發(fā)現(xiàn)任何相關(guān)基因突變。為篩選出該家系的致病基因突變，用WES手段進(jìn)行分析，并通過(guò)S

4、anger DNA測(cè)序方法進(jìn)行突變驗(yàn)證。(2)收集了4個(gè)EPPK家系的臨床資料及外周抗凝血樣本，用PCR-Sanger測(cè)序、AS-PCR等方法分析和驗(yàn)證KRT9基因突變。對(duì)其中3個(gè)高風(fēng)險(xiǎn)患病胎兒家系進(jìn)行羊水產(chǎn)前DNA診斷。
　　結(jié)果:(1)WES篩選出本疑似Olmsted綜合征家系的致病突變?yōu)?TRPV3基因突變c.1703G＞A(p.Gly568Asp)雜合性錯(cuò)義突變。(2)4個(gè)EPPK家系均存在KRT9基因突變。其中，2個(gè)家系

5、為最常見的突變:c.487C＞T（p.Arg163Trp）雜合性錯(cuò)義突變，另外2個(gè)家系的突變分別為:c.482A＞G(p.Asnl61Ser)、c.566A＞G(p.Tyr189Cys)。對(duì)胎兒的羊水基因組DNA進(jìn)行的分析表明，3個(gè)家系的胎兒均不幸攜帶了KRT9致病基因突變。
　　結(jié)論:(1)結(jié)合所研究的家系患者的臨床癥狀，所發(fā)現(xiàn)的TRPV3基因突變:c.1703G＞A(p.Gly568Asp)確診家系為Olmsted綜合征。不僅