亞低溫對HICH大鼠線粒體Na+-K+-ATP酶和線粒體結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：高血壓腦出血(Hypertensive intracerebral hemorrhage，HICH)對人體的傷害主要包括原發(fā)性損害和繼發(fā)性損害，繼發(fā)性損害比原發(fā)性損害對腦組織損傷更嚴(yán)重。原發(fā)性損害是指出血后形成的血腫對腦組織的直接壓迫；繼發(fā)性損害是指繼發(fā)血腫周圍腦組織局部缺血缺氧，血腫的崩解產(chǎn)物對神經(jīng)元細(xì)胞的毒性作用，使血腫周圍的腦組織神經(jīng)元細(xì)胞由近及遠(yuǎn)的發(fā)生水腫、變性、出血、凋亡和壞死。線粒體是細(xì)胞內(nèi)重要的細(xì)胞器，三羧酸循環(huán)、電

2、子傳遞和氧化磷酸化均在線粒體中進(jìn)行。在生理情況下，它是細(xì)胞的能量轉(zhuǎn)換器，支持細(xì)胞的存活；十余年來，亞低溫(33℃-35℃)的腦保護(hù)作用得到國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的廣泛研究，亞低溫的腦保護(hù)作用一直是神經(jīng)外科的熱點(diǎn)和難點(diǎn)，具體的保護(hù)機(jī)制未完全研究清楚。本實(shí)驗(yàn)通過高血壓腦出血(HICH)大鼠模型進(jìn)行亞低溫干預(yù)，通過常溫組和亞低溫組對照，觀察亞低溫治療前后線粒體Na+-K+-ATP酶和線粒體顯微結(jié)構(gòu)的變化，研究出亞低溫對HICH的保護(hù)機(jī)制。
　　

3、方法：健康成年雄性SD大鼠72只，體質(zhì)量(250±25)g，由大連醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。并采用隨機(jī)數(shù)字表法分為腦出血組(A組)、亞低溫治療組(B組)、對照組(C組)。根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜用微量注射器取大鼠自體不凝血50μL將注血針通過顱頂骨窗緩慢插入右側(cè)尾狀核內(nèi)，制作高血壓腦出血(HICH)模型，A組：腦出血模型制作成功后給予常溫治療；B組：腦出血模型制作成功后給予亞低溫治療；C組：手術(shù)過程同A組和B組，注入0.9％的生理鹽水

4、50μL。分別于術(shù)后2h、24h、3d、7d四個時(shí)間段各個組的SD大鼠進(jìn)行斷頭取血腫壁周圍腦組織，提取線粒體，采用改良Lowry氏法檢測線粒體Na+-K+-ATP酶和電鏡下觀察線粒體的顯微結(jié)構(gòu)，三個組各個時(shí)間段進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：腦出血后在2h、24h、3d、7d四個時(shí)間段Na+-K+-ATP酶活性亞低溫治療組(B組)明顯高于腦出血組(A組)；對照組(C組)明顯高于腦出血組(A組)；對照組(C組)明顯高于亞低溫治療組(B組)

5、。腦出血組(A組)隨著時(shí)間延長，血腦屏障內(nèi)皮細(xì)胞反應(yīng)性增大，星形細(xì)胞腫脹，毛細(xì)血管嚴(yán)重縮窄，線粒體腫脹，脊不清楚，脊破裂；亞低溫治療組(B組)星形細(xì)胞輕度腫脹，神經(jīng)元輕度固縮，線粒體出現(xiàn)嵴模糊不清數(shù)量少，到7d后神經(jīng)元形態(tài)與正常腦組織組織差別不大，明顯好于腦出血組(A組)。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，亞低溫保護(hù)了保護(hù)了線粒體結(jié)構(gòu)的相對完整性，最大程度保存了線粒體能量代謝功能，減輕了神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡、壞死。實(shí)驗(yàn)結(jié)果研究還表明，腦