2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用從該省辣椒地方品種資源中篩選出的抗病品種為材料,在優(yōu)化了其RNA提取方法的基礎(chǔ)上,構(gòu)建辣椒葉片響應(yīng)UV輻射而表達(dá)的cDNA文庫,主要結(jié)果如下:(1)以經(jīng)過UV輻射處理后的辣椒葉片為研究材料,優(yōu)化了辣椒RNA提取方法,在該方法下所提取的RNA質(zhì)量,能夠很好的滿足構(gòu)建文庫的要求.(2)利用MMLV反轉(zhuǎn)錄酶把總RNA中的mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,用特異引物進(jìn)行LD-PCR擴(kuò)增合成雙鏈cDNA;用CHROMA SPIN-400Colu

2、mn對cDNA進(jìn)行分級分離,去除小于500bp的cDNA片段;用帶有粘性末端的雙鏈cDNA與λTriplEx2載體連接,利用λ噬菌體包裝蛋白對合成的雙鏈cDNA進(jìn)行體外包裝,包裝產(chǎn)物侵染E.coli XL-Blue獲得cDNA 文庫.該cDNA文庫的滴度為1.191×106,克隆數(shù)為1.112×106,擴(kuò)增后的滴度為1.532×1010,插入片段平均大小在1kb左右,藍(lán)白斑篩選證實(shí)其重組率大于80％.同時(shí),由于反轉(zhuǎn)錄過程中采用附加序列的

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