應(yīng)用mRNA差異顯示技術(shù)研究藥物誘導(dǎo)小鼠紅白血病細(xì)胞沿紅系分化過(guò)程中基因表達(dá)的變化.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用mRNA差異顯示技術(shù)研究藥物誘導(dǎo)小鼠紅白血病細(xì)胞沿紅系分化過(guò)程中基因表達(dá)的變化姓名：陳渝萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：薛社普劉德培1999.6.1主鎏墊塑蔓登鲞蘭簦圭蘭壁燕塞!我們接著采用了殷向Northern點(diǎn)印跡和Northern雜交技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證了部分差異cDNA片段的差異性。39個(gè)片段中有28個(gè)經(jīng)點(diǎn)雜交證實(shí)和箍示譜上的原始情形一致，18個(gè)片段中有11個(gè)經(jīng)Northern雜交證實(shí)為陽(yáng)

2、性片羧。弱j璉：我翅夔差示囂忝勢(shì)輯熬瓣援攀已達(dá)60％浚上。最后，根據(jù)35#克隆的原始序列我們?cè)O(shè)計(jì)了三條特異引物。以誘導(dǎo)細(xì)胞的RNA禽成的cDNA雙鏈與假銜羧予的連接產(chǎn)物作為模板，制用RACE技術(shù)分鬟對(duì)35#堯隆靜3’秘5’旁籍序列避簿了擴(kuò)蠖。雋提裹黢cE靛特異瞧，我們?nèi)靻舞s特異雩l鏹PCR和攙稍阮R兩秘方法結(jié)合起來(lái)，成功絕擴(kuò)增了35#克隆的5’和3’的旁側(cè)序列，其長(zhǎng)度分別為874bp和1063bp。該轉(zhuǎn)錄本總長(zhǎng)為1887bp，和35#黨