黏菌素神經毒性小鼠模型建立、機制探討及NGF保護作用.pdf

1、近10年來，黏菌素是目前臨床治療多重耐藥細菌感染的最有效藥物之一，臨床應用持續(xù)增加，常常被作為臨床重癥患者的最后一線治療希望。神經毒性是黏菌素臨床應用的主要副作用之一，嚴重制約著其最佳療效，但神經毒性的機制目前尚不清楚。因此，明確其毒性機制為尋找新的減毒措施指導臨床用藥具有重要意義，倍受國內外關注。本文通過模擬臨床給藥，靜脈注射硫酸黏菌素，利用多重評價方式，建立小鼠神經毒性模型，探討線粒體氧化應激介導的黏菌素神經毒性作用機制及外源性神經

2、生長因子(NGF)對黏菌素神經毒性的保護作用。
　　 昆明系雌性小鼠18～22 g，隨機分為高、中、低三個劑量組和生理鹽水對照組，分別通過靜脈注射給予黏菌素15、7.5、5.0 mg/kg和生理鹽水，連續(xù)給藥7d。以給藥當天為第0d，分別于給藥后第1、3、7、15d進行了一般毒性評價、神經行為學組合測試（自發(fā)活動能力、感覺功能及運動功能）、神經電生理測試（M波參數、F波參數及EMG測試）、神經形態(tài)學評價（光學病理學及超微結構觀察

3、）、氧化-抗氧化系統(tǒng)生相關生化指標測定、凋亡相關因子表達及含量（caspase-9和3）檢測、NGF含量及相關受體表達（TrkA及p75NTR）檢測;在此基礎上，設立對照組（0.9％氯化鈉）、黏菌素模型組（硫酸黏菌素15 mg/kg）、NGF保護組(硫酸黏菌素15 mg/kg+36μg/kg)，連續(xù)給藥7d后進行神經行為學、神經電生理學、NGF含量及相關受體表達（TrkA及p75NTR）檢測。結果表明:
　　 (1)通過劑量依賴

4、性及時間依賴行分析，硫酸黏菌素每天靜脈注射15 mg/kg，連續(xù)給藥7d，可成功建立黏菌素神經毒性小鼠模型。
　　 (2)通過神經行為學組合測試及神經電生理學測試，黏菌素可導致小鼠感覺功能及運動功能失調，其中熱痛閾值及SNCV及F波潛伏期最為敏感;提示F波潛伏期及SNCV可作為臨床黏菌素神經毒性的指示性診斷指標。
　　 (3)黏菌素可導致小鼠神經系統(tǒng)氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡，致使線粒體變性，caspase-9和3顯著升高;提