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1、目前商業(yè)化的裂解流感疫苗或亞單位流感疫苗在應(yīng)用于嬰幼兒或老年人群時其有效性會只有60%-90%,而這些人群流感發(fā)生機(jī)率相對較高。為了更有效的提高疫苗的可靠性,需要采取一些有效的措施來提高裂解流感疫苗或流感病毒亞單位疫苗的免疫原性。其中,能夠減少流感疫苗使用量的有效佐劑,最有希望在流感高發(fā)季節(jié),疫苗供不應(yīng)求時起到其他措施無與倫比的功效和作用。 在過去多年中,科學(xué)工作者和疫苗開發(fā)商長期致力于開發(fā)這類理想的有效疫苗佐劑,取得了一些進(jìn)展
2、,其中含胞嘧啶-鳥嘌呤二核苷酸(CpG)的脫氧寡核酸鏈(CpG oligodeoxynucleotides, CpG ODN)便是最有希望的一類佐劑。在本研究中,通過分析CPG 7909、M362、CPG 10109和CPG 2395對人外周血單個核細(xì)胞的刺激效果,選取刺激效果較為均衡的CPG 10109進(jìn)行進(jìn)一步的動物實(shí)驗(yàn)。檢驗(yàn)CPG10109對提高流感病毒亞單位疫苗免疫原性和有效減少疫苗使用量方面的佐劑效應(yīng),以及當(dāng)以陽離子乳酸/羥乙
3、酸共聚物(cPLGA)包裹流感病毒亞單位疫苗時,CPG 10109對流感病毒亞單位-cPLGA 納米微球免疫功能的影響。免疫方法是:將流感病毒亞單位疫苗或疫苗包裹于cPLGA中,在加入或未加入CPG 10109 時,皮下免疫小鼠,四周和60天加強(qiáng)免疫一周后取血制備血清,取小鼠脾制備脾細(xì)胞懸液。在脾細(xì)胞培養(yǎng)中,加入回憶抗原(recall antigen),比較各組脾細(xì)胞增殖效果差異和分泌的γ干擾素(IFN-γ)和白細(xì)胞介素4(IL-4)濃
4、度,ELISA測定血清中血凝素特異性IgG1和IgG2a抗體滴度,從而比較各組疫苗的免疫原性以及CPG 10109的佐劑效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,CPG 10109加入后,脾細(xì)胞增殖與IFN-γ分泌量顯著增加。另外CPG 10109還顯著提高了免疫小鼠中血凝素(hemagglutinin, HA)特異性IgG抗體水平。初次免疫四周后,HA特異性IgG1和IgG2a均有明顯增長;加強(qiáng)免疫一周后,主要是IgG2a增長。在1/10劑量組中
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