HPLC柱后衍生化法在伏格列波糖質(zhì)量控制中應(yīng)用的研究.pdf

1、糖尿病是以慢性高血糖為特征的一組異質(zhì)性代謝性疾病,由某種原因造成胰島素絕對或相對缺乏所引起,以慢性高血糖伴碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝障礙為特征,糖尿病的患者人數(shù)也隨著人們生活水平的提高而逐年上升。目前處于研究階段的口服糖尿病藥物有口服胰島素制劑、促胰島素分泌劑、胰島素增敏劑、α-葡萄糖苷酶抑制劑等四類。伏格列波糖是一種新型的α-葡萄糖苷酶抑制劑,由日本武田藥品工業(yè)株式會社開發(fā)研制,并于1994年上市,其商品名為倍欣。與其它α-葡萄糖

2、苷酶抑制劑相比,伏格列波糖具有活性高、劑量小、胃腸道內(nèi)副作用小等優(yōu)點。由于分子中并無共軛結(jié)構(gòu)和生色團,伏格列波糖無法采用HPLC/UV、HPLC/FLD等分析方法進行檢測。國內(nèi)外研究者曾采用過HPLC/UV、HPLC/ELSD、HPLC/RID、柱前衍生-GC、柱前衍生-HPLC、HPLC柱后衍生熒光分析法等分析法。與其它分析方法相比,HPLC柱后衍生熒光分析法具有選擇性好、靈敏度高等優(yōu)點,適合用于伏格列波糖及其制劑的質(zhì)量控制中。

3、>　　 本文建立了一種用于伏格列波糖及其制劑質(zhì)量控制的HPLC柱后衍生熒光分析方法,并對可能影響伏格列波糖峰面積的柱后衍生因素進行了考查。本研究主要分為兩個部分：第一部分豐要是HPLC柱后衍生熒光分析方法的建立及優(yōu)化；第二部分是HPLC柱后衍生因素的考查。主要內(nèi)容如下：⑴采用Zorbax SB-aq4.6*250mm5μm;含不同濃度辛烷磺酸鈉的磷酸鹽緩沖液為流動相;熒光檢測器檢測(激發(fā)波長為350nm,發(fā)射波長430nm,PMT設(shè)為

4、16);牛磺酸和高碘酸鈉為衍生試劑:反應(yīng)浴溫度100℃,衍生反應(yīng)管長20m(內(nèi)徑,0.5mm):冷卻浴溫度15℃,冷卻管長2m(內(nèi)徑,0.3mm)。⑵采用單因素實驗設(shè)計考查了T形三通接法、反應(yīng)浴溫度、冷卻浴溫度、衍生試劑濃度、伏格列波糖濃度、流動相與衍生試劑流速及二者的流速比等柱后衍生因素對伏格列波糖峰面積的影響,結(jié)論如下：T形三通的接法對伏格列波糖峰面積影響不大,但對其理論塔板數(shù)有一定的影響；在一定范圍內(nèi),伏格列波糖峰面積隨著反應(yīng)浴溫