馬干擾素誘導(dǎo)蛋白Mx2對(duì)慢病毒復(fù)制的限制作用及其機(jī)制研究.pdf

1、人的Mx2蛋白（又稱MxB蛋白），全稱人Ⅱ型黏病毒對(duì)抗蛋白(Myxovirus resistance proteinsⅡ)，隸屬于Mx蛋白家族。其家族中的Ⅰ型黏病毒對(duì)抗蛋白(Myxovirus resistance proteinsⅠ，Mx1，也稱MxA)具有對(duì)抗多種RNA和DNA病毒能力，特別是在干擾素對(duì)抗正黏病毒科流感病毒的過(guò)程中扮演重要角色，是檢測(cè)干擾素作用的標(biāo)記分子。該家族的蛋白也因此得名。
　?、蛐宛げ《緦?duì)抗蛋白，雖被命

2、名為黏病毒對(duì)抗蛋白，但長(zhǎng)久以來(lái)被認(rèn)為不具有對(duì)抗黏病毒感染的能力。不僅如此，該蛋白也一直被認(rèn)為不具有任何抗病毒的功能，而是在調(diào)控細(xì)胞的核質(zhì)運(yùn)輸及細(xì)胞分裂周期等細(xì)胞固有功能中發(fā)揮作用。直到2013年，兩篇Nature文章同時(shí)發(fā)現(xiàn)Mx2蛋白在干擾素誘導(dǎo)的對(duì)抗人免疫缺陷病毒(HIV-1)的感染中起關(guān)鍵作用。后續(xù)研究證實(shí)，該蛋白主要定位在細(xì)胞核膜上，并通過(guò)其N端結(jié)構(gòu)域與病毒的衣殼蛋白(CA)結(jié)合，在衣殼蛋白參與的病毒基因組反轉(zhuǎn)錄之后、整合之前的復(fù)

3、制階段發(fā)揮重要的阻斷功能。
　　到目前為止的研究只發(fā)現(xiàn)了人Mx2蛋白的抗病毒功能，且只限于靈長(zhǎng)類慢病毒，即人免疫缺陷病毒(HIV-1)以及一些猴免疫缺陷病毒(SIVs)。對(duì)非靈長(zhǎng)類動(dòng)物的逆轉(zhuǎn)錄病毒，如馬傳染性貧血病毒(EIAV)，人的Mx2蛋白不具有限制作用。不僅如此，目前對(duì)非靈長(zhǎng)類動(dòng)物的Mx2蛋白的研究也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其具有任何的抗病毒功能。本文對(duì)馬Mx2蛋白的功能進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)，馬的Ⅰ型干擾素可以明顯的上調(diào)馬外周血來(lái)源的單核巨

4、噬細(xì)胞(eMDM)中Mx2基因的表達(dá)水平。過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，馬的Mx2蛋白不僅能夠限制人免疫缺陷病毒HIV-1等靈長(zhǎng)類慢病毒的復(fù)制，而且也能限制非靈長(zhǎng)類慢病毒EIAV的復(fù)制，但對(duì)伽瑪逆轉(zhuǎn)錄病毒屬的逆轉(zhuǎn)錄病毒(MLV)不具有明顯的限制作用?；蚯脺p實(shí)驗(yàn)證實(shí)，馬Mx2蛋白表達(dá)的敲低會(huì)減弱Ⅰ型干擾素對(duì)EIAV病毒的限制功能。通過(guò)構(gòu)建截短蛋白和嵌合蛋白，證實(shí)馬Mx2蛋白與人Mx2蛋白一樣，其N端結(jié)構(gòu)域是發(fā)揮限制功能的關(guān)鍵區(qū)域。有趣的是，間接免疫熒

5、光實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在病毒感染后該蛋白的細(xì)胞定位會(huì)發(fā)生改變，由原有的散在于細(xì)胞質(zhì)中的定位變?yōu)橐约?xì)胞核周為主的定位方式，并可以與進(jìn)入細(xì)胞的病毒衣殼蛋白共定位。其N端缺失的突變體由于不能與衣殼蛋白結(jié)合而喪失抗病毒功能。人的Mx2蛋白因?yàn)椴荒芘cEIAV的衣殼蛋白結(jié)合，而不具有EIAV病毒的限制功能，印證了之前研究的結(jié)論。
　　本研究首次證明了馬Mx2具有抗靈長(zhǎng)類動(dòng)物慢病毒的活性，同時(shí)具有抗馬屬動(dòng)物慢病毒EIAV的功能，是一種天然免疫種間限制因子