Nrf2信號(hào)通路在葡萄籽原花青素降低鉛誘導(dǎo)的大鼠腎臟氧化應(yīng)激中的作用.pdf

1、鉛(Lead，Pb)是一種已知的重金屬有毒物質(zhì)，廣泛存在于環(huán)境中。研究發(fā)現(xiàn)，慢性Pb中毒可使腎臟內(nèi)自由基增加，引起腎臟氧化應(yīng)激。葡萄籽原花青素(Grape seedproanthocyanidin extract，GSPE)是天然多酚類化合物，具備清除自由基、抗氧化和抗炎等功能。本研究的主要目的是明確GSPE在Pb暴露大鼠腎臟氧化損傷方面的保護(hù)作用及核因子E2相關(guān)因子2(NF-E2-related factor2，Nrf2)信號(hào)通路在G

2、SPE保護(hù)Pb誘導(dǎo)的腎臟氧化損傷中的作用機(jī)制。
　　在本研究中，共選取40只健康雄性wistar大鼠，隨機(jī)分為四組:對(duì)照組、Pb暴露組、解毒組(Pb+GSPE)和GSPE組，每組10只。試驗(yàn)周期為30d，對(duì)照組:自由飲水，生理鹽水(1 mL/kg·d)灌胃;Pb暴露組:0.25％醋酸鉛(lead acetate，PbAc)溶液自由飲用，生理鹽水(1 mL/kg·d)灌胃;解毒組(Pb+GSPE):0.25％PbAc溶液自由飲用，G

3、SPE溶液(200mg/kg·d)灌胃;GSPE組:自由飲水，GSPE溶液(200 mg/kg·d)灌胃。
　　在第31d進(jìn)行采樣測(cè)定:
　　(1)分別稱取大鼠體重和兩側(cè)腎臟總質(zhì)量，計(jì)算腎臟臟器指數(shù)。
　　(2)大鼠腹主動(dòng)脈采血，離心取血清，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清肌酐（Serum creatinine，SCr）和尿素氮(Bloodurea nitrogen，BUN)水平。
　　(3)火焰原子吸收光譜法測(cè)定腎臟中

4、Pb的含量。
　　(4)腎臟組織切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡觀察組織病理變化。
　　(5)腎臟組織勻漿，應(yīng)用試劑盒測(cè)定腎臟中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛(Methane dicarboxylic aldehyde，MDA)、還原性谷胱甘肽(Glutathione，GSH)和谷胱甘肽s轉(zhuǎn)移酶(Glutathione s-transferase，GST)的水平。
　　(6)原位末

5、端標(biāo)記法(Terminal Deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick-EndLabeling，TUNEL)測(cè)定腎臟中細(xì)胞凋亡水平。
　　(7)免疫組化檢測(cè)腎臟中Nrf2的表達(dá)。
　　(8)提取腎臟總蛋白，western blotting測(cè)定腎臟中Nrf2、Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1(Kelch-likeECH-associated protein1，Keap1)、血紅素氧合

6、酶1（Heme oxygenase-1，HO-1）、醌氧化還原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase1，NQO1）、Bax、Bcl-2和Bcl-xl蛋白的含量。
　　結(jié)果表明:
　　(1)GSPE可以降低Pb暴露大鼠SCr和BUN水平，作用效果達(dá)到10％和31％，還可降低Pb中毒引起的臟器指數(shù)增加，作用效果達(dá)到21％，修復(fù)組織損傷。
　　(2)GSPE降低Pb在體內(nèi)的蓄積，效果可達(dá)到33％。