BMP9誘導間充質(zhì)干細胞骨向分化與PTEN的關(guān)系研究.pdf

1、骨缺損、骨不接是常見的骨科疾病，明顯影響到人們的正常生活。因此，高效的骨再生對臨床上治療創(chuàng)傷、疾病或手術(shù)所致節(jié)段性骨缺損、骨不連接及脊柱融合等具有重要意義。本課題主要研究 PTEN與骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（BMP9）誘導間充質(zhì)干細胞(MSCs)成骨分化的關(guān)系及影響 BMP9誘導 MSCs成骨分化的可能分子機制。本研究采用RT-PCR、Western blot、免疫細胞化學染色、堿性磷酸酶（ALP）染色與活性檢測、茜素紅S染色、體內(nèi)異位成骨實驗

2、、Micro-CT（μ-CT）成像、組織切片染色、周期分析、螢光素酶報告質(zhì)粒等實驗方法，首先，檢測了PTEN的內(nèi)源性表達以及BMP9對PTEN表達的影響；然后，利用PTEN抑制劑通過體外實驗，分析PTEN對BMP9誘導MSCs成骨分化的影響，并利用PTEN重組腺病毒通過體內(nèi)實驗，分析PTEN對BMP9誘導MSCs異位成骨的影響；最后，利用熒光素酶報告質(zhì)粒、PTEN抑制劑(VO)、COX-2沉默或過表達重組腺病毒、PI3K/Akt抑制劑(

3、LY294002)對PTEN影響B(tài)MP9誘導MSCs成骨分化的機制進行分析。結(jié)果顯示，PTEN在幾種干細胞中均有表達，BMP9能夠抑制PTEN在MEFs中表達；PTEN抑制劑能夠增強BMP9誘導MEFs成骨分化，外源性過表達PTEN能夠抑制BMP9誘導MEFs異位成骨；PTEN抑制劑能夠促進BMP9誘導MEFs BMPs/Smads信號通路的激活；沉默表達COX-2能夠?qū)TEN抑制劑增強BMP9誘導ALP活性增加具有抑制作用；另外，P