綠茶長期暴露改變小鼠味覺系統(tǒng)及味覺偏好行為研究.pdf

1、天然中草藥類物質(zhì)綠茶由于其在肥胖及超重問題解決中的特殊功效受到廣泛關(guān)注，但其抑制肥胖控制體重的機(jī)制，目前主要來自于增加能量消耗，對(duì)于其改變能量攝入的機(jī)制尚不清楚，而味覺系統(tǒng)是動(dòng)物食物攝入的決定性因素，所以本研究假設(shè)綠茶的長期攝入改變動(dòng)物味覺外周感受器味蕾特征，從而改變動(dòng)物味覺行為，進(jìn)而改變動(dòng)物能量攝入，達(dá)到體重控制或降低體重作用。
　　 本研究以ICR成年小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，綠茶及綠茶中主要活性成分（咖啡因、茶多酚、茶氨酸）暴露成年

2、ICR小鼠21天后，以小鼠的舌上皮為材料，運(yùn)用舌上皮整體裝片技術(shù)、免疫組化、激光共聚焦顯微技術(shù)及蛋白質(zhì)免疫印跡等方法，探討了綠茶長期攝入后味覺外周感受系統(tǒng)的特征變化，以此為基礎(chǔ)進(jìn)一步通過經(jīng)典動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)，分析了長期綠茶攝入后小鼠可口性和高能量食物偏好的變化。結(jié)果如下:
　　 (1)綠茶及其活性成分暴露改變味蕾基本解剖形態(tài)
　　 綠茶及其活性成分暴露改變小鼠菌狀味蕾基本形態(tài):與對(duì)照組小鼠相比，綠茶和所有活性成分長期暴露后均

3、顯著減小菌狀味蕾的最大橫截面積，從對(duì)照組1000μm2左右降低到刺激組的900μm2左右;綠茶及咖啡因+茶多酚刺激組顯著降低菌狀味蕾的數(shù)量，降低約17.5％和14.3％。0.5％茶多酚、茶氨酸、咖啡因+茶多酚均顯著減少菌狀乳頭味蕾中味細(xì)胞數(shù)量，分別降低約22.8％、14.5％、22.5％。
　　 綠茶及各種功能成分長期暴露影響小鼠軟腭味蕾中味細(xì)胞數(shù)量，與對(duì)照組小鼠相比，綠茶、咖啡因、0.5％茶多酚、茶氨酸、咖啡因+茶多酚均顯著減

4、少軟腭單個(gè)味蕾中味細(xì)胞數(shù)量，分別降低約15.8％、14.5％、16％、19.2％、10.7％。
　　 (2)綠茶及其活性成分暴露改變味覺信號(hào)傳導(dǎo)及味覺敏感度調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白表達(dá)
　　 免疫組化結(jié)果表明綠茶及其不同功能成分長期暴露后改變味蕾中不同味覺信號(hào)傳導(dǎo)蛋白的表達(dá)，并且這種改變具有區(qū)域差異性。
　　 與對(duì)照組小鼠相比，綠茶及其所有功能成分長期暴露均顯著降低單個(gè)菌狀味蕾中α-gustducin（α-味蛋白）陽性細(xì)胞數(shù)

5、量，分別降低12.3％、20.9％、17.6％、15.3％、16.7％、20.9％（按圖上順序）。對(duì)輪廓狀乳頭與軟腭中單個(gè)味蕾中α-gustducin陽性細(xì)胞數(shù)量的表達(dá)無顯著影響（除了咖啡因暴露降低輪廓狀乳頭味蕾味細(xì)胞中味蛋白表達(dá)）。
　　 綠茶、茶氨酸、咖啡因+0.06％茶多酚長期暴露降低菌狀乳頭中表達(dá)PLCβ2（磷脂酶Cβ2）蛋白的陽性細(xì)胞數(shù)量，分別降低18.3％、14.2％和15.1％左右;軟腭中PLCβ2陽性細(xì)胞數(shù)量也有

6、不同程度的降低，約是19.6％、21.2％、15.3％、21％、9.3％和23％左右（按圖上順序）;輪廓狀乳頭中除了綠茶、0.5％茶多酚和咖啡因+0.06％茶多酚組其他均影響不大。
　　 WB結(jié)果表明，與免疫組化的結(jié)果相類似，綠茶以及咖啡因長期暴露顯著降低菌狀味蕾中α-gustducin表達(dá)豐度，分別降低約50％與70％，而對(duì)PLCβ2及突出小體相關(guān)蛋白25(SNAP25:synaptosomal-associatedprote

7、in25)基本無影響。除此之外，WB結(jié)果還表明綠茶長期暴露降低舌面脂肪細(xì)胞調(diào)控因子大麻素1受體(CB1R:Cannabinoid1Receptor)的表達(dá)（降低20％左右），上調(diào)舌面瘦素受體（Ob-Rb:LeptinReceptor）的表達(dá)（增加約30％）。
　　 (3)綠茶長期暴露改變小鼠甜味與脂味偏好
　　 根據(jù)上述味覺感受基礎(chǔ)變化結(jié)果，動(dòng)物味覺雙瓶喜好(TBP:TwoBottlePreference)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

8、表明，與對(duì)照組小鼠相比，長期綠茶攝入顯著增加小鼠蔗糖偏好閾值，從0.32增加到3.8mmol/L;降低蔗糖及大豆油偏好率，分別降低約20％及25％，增加高濃度AK糖、亞油酸及低濃度山梨醇偏好率。
　　 綜上所述，本文證實(shí)了綠茶及其活性成分通過改變小鼠味覺感受基礎(chǔ)特性（即減少味蕾總數(shù)、味蕾最大橫截面積、味蕾細(xì)胞數(shù)量及味覺信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白表達(dá)、相關(guān)脂肪細(xì)胞調(diào)控與味覺敏感蛋白表達(dá)），降低小鼠對(duì)蔗糖、大豆油的偏好率。而這些變化可能影響相關(guān)味