紅景天苷和榆黃蘑多糖對酒精性脂肪肝脂肪蓄積和炎性反應的作用及機制的研究.pdf

1、目的:本實驗的目的是研究天然產物紅景天苷和榆黃蘑多糖對酒精性脂肪肝脂肪蓄積和炎癥的作用及機制。
　　方法:1.紅景天苷體內實驗部分使用C57BL/6小鼠建立酒精狂飲模型。通過HE染色和油紅O染色觀察小鼠肝臟病理變化;檢測血清中ALT、AST和IL-1β的含量;通過免疫組化實驗觀察小鼠肝臟中NLRP3和P2x7R的表達情況。體外實驗部分使用LPS刺激Raw264.7細胞和小鼠腹腔巨噬細胞，提取細胞總蛋白和RNA，通過蛋白印跡實驗和q

2、PCR檢測IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的變化。
　　2.榆黃蘑多糖體內實驗分別建立急、慢性小鼠酒精性肝損傷模型，檢測小鼠血清和肝臟中ALT、AST和TG的水平;通過HE染色、油紅O染色和Masson染色觀察小鼠肝臟病理變化;通過免疫組化實驗檢測小鼠肝臟內SIRT1、AMPKα、SREBP1和P2x7R蛋白的表達情況。體外實驗部分用酒精刺激HepG2細胞，利用尼羅紅染色觀察細胞內脂肪含量的變化，并提取細胞總蛋白，對AMPKα

3、和P-AMPKα的表達情況進行檢測。
　　結果:1.體內實驗中，紅景天苷預處理能減輕酒精狂飲所致小鼠肝臟炎性反應相關蛋白P2x7R和NLRP3的表達，減少血清中轉氨酶和促炎性細胞因子IL-1β的水平;體外實驗中，紅景天苷能下調LPS刺激Raw264.7細胞和小鼠腹腔巨噬細胞導致的促炎性細胞因子IL-1β和TNF-αt的基因和蛋白水平。
　　2.榆黃蘑多糖在體內能減輕急、慢性酒精攝入引起的小鼠肝臟的炎癥反應和脂肪蓄積，減少血清